亮*酸氨基肽酶活性检测试剂盒 微量法

亮*酸氨基肽酶（LAP）活性检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC4145
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：
试剂二：临用前加入2.5 mL丙 酮溶解。
产品说明：
LAP是一种膜结合酶，广泛存在于肝、胆、胰等组织中，参与组织蛋白和某些肽类的降解更新。各类肝病患者因肝细胞损伤，血清LAP的活性均有不同程度的升高，LAP可以作为各类肝病的一项初步检测指标，特别是肝癌鉴别诊断的指标。
LAP分解L-亮*酸对硝基 苯胺生成对硝基 苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算LAP活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、丙 酮、匀浆器/研钵、冰、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
1、ΔA大于0.5时或者A值大于1.5时建议将样本上清用试剂一稀释后再进行测定。
2、空白管的ΔA变化小于0.01。
实验实例：

1. 取0.1g小鼠肾脏加入1mL试剂一进行匀浆研磨，取上清按照测定步骤操作，用微量玻璃比色皿测得计算ΔA测定管= A2测定-A1测定=0.4537-0.3691=0.0846，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.0157-0.0133=0.0024，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0846-0.0024=0.0822，按样本质量计算酶活得：LAP（U/g 质量）=675.4×ΔA÷W=675.4×0.0822÷0.1=555.1788 U/g 质量。

2. 取鸡血清直接按照测定步骤操作，用微量玻璃比色皿测得计算ΔA测定管= A2测定-A1测定=0.094-0.0798=0.0142，ΔA空白管=A2空白-A1空白=0.0157-0.0133=0.0024，ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0142-0.0024=0.0118，按样本质量计算酶活得：LAP（U/g 质量）=675.4×ΔA=675.4×0.0118=7.9697 U/g 质量。

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