品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC4175-100T/96S |
规格 | 100T/96S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 肉桂醇脱氢酶(CAD)活性检测 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体120 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 粉剂×1瓶 | -20℃保存 |
试剂二 | 液体×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体25 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
提取液:内含不溶物,使用前摇匀。
试剂一:临用前加入5 mL试剂三溶解。可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融。
试剂二:液体置于试剂瓶内玻璃管中。临用前加入15 mL乙醇充分混匀,配好后2-8℃保存。
工作液的配制:将试剂一、试剂二、试剂三按1:1:2(V:V:V)的比例配制工作液,工作液现用现配。
紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节波长至340nm,紫外分光光度计蒸馏水调零。
操作表:在微量石英比色皿/96孔UV板中分别加入下列试剂:
试剂名称 | 空白管 | 测定管 |
样本(µL) | 20 | |
蒸馏水(µL) | 20 | |
工作液(µL) | 180 | 180 |
在微量石英比色皿/96孔UV板中分别加入上述试剂,充分混匀后于340nm处测定10s时的吸光值A1,迅速置于25℃水浴或培养箱5min(酶标仪有控温功能可将温度调至25℃),拿出迅速擦干测定5min10s时的吸光值A2,计算ΔA测定管=A1测定-A2测定,ΔA空白管=A1空白-A2空白,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管(空白管只需做1-2次)。 |
当A1小于0.8,建议将样本用蒸馏水稀释后再进行测定。
空白管为检测各试剂组分质量的检测孔,正常情况下,变化不超过0.04。
取约0.1g三叶草叶,加入1mL提取液进行冰浴匀浆,然后10000g,4℃,离心10min,取上清,按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测定计算ΔA测定管= A1测定-A2测定=1.7889-1.7045=0.0844,ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.9630-0.9433=0.0197,ΔA=ΔA测定管-ΔA空白管=0.0844-0.0197=0.0647,按样本质量计算得:CAD酶活(U/g 质量)=321.54×ΔA÷W=208.0364 U/g 质量。
肉桂醇脱氢酶活性检测试剂盒 微量法 肉桂醇脱氢酶活性检测试剂盒 微量法