品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | 货号 | BC3595 |
---|---|---|---|
规格 | 100管/96样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 过氧化氢(H2O2)含量检测 | 应用领域 | 医疗卫生,化工,生物产业,石油 |
过氧化氢(H2O2)含量检测试剂盒
操作步骤:
一、H2O2提取:
1、细菌或细胞样品的制备: 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一,超声 波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。
2. 组织样品的制备: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待 测。
3、血清(浆)样品:按照每 100μL 血清(浆)加入 0.9mL 试剂一的比例充分混匀;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
注意事项:
1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。
2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。
二、测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长 415nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
3、如果用 96 孔板将则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 2μmol/mL 的标准溶液,用微量玻璃比色 则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。
三、H2O2含量计算:
1、按照细菌、细胞数量计算:
H2O2含量(μmol/104cell)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷(500×V 样本÷V 提取) =0.004×∆A 测定÷∆A 标准。
2、按组织鲜重计算:
H2O2含量(μmol/g 鲜重)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷(V 样本÷V 提取×W) =2×∆A 测定÷∆A 标准÷W。
3、按照蛋白浓度计算:
H2O2含量(μmol/mgprot)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×V 样本÷(Cpr×V 样本) =2×∆A 测定÷∆A 标准÷Cpr。
4、按血清(浆)体积计算:
H2O2含量(μmol/mL)=∆A 测定÷(∆A 标准÷C 标液)×10 =20×∆A 测定÷∆A 标准。
500:细胞或细菌总数,万个;C 标液:H2O2标准溶液浓度,2μmol/mL;V 样本:加入的样本 体积,0.25mL;W:组织鲜重,g;V 提取:提取过程中所用体积,1mL;Cpr:样品蛋白浓度,mg/mL; 10:血清稀释倍数,[0.1mL 血清(浆)+0.9mL 试剂一]÷0.1mL 血清(浆)=10。
注意:如果用微量玻璃比色皿(光径 d=1cm)将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。 计算公式亦作改变。
操作步骤:
一、H2O2提取:
1、细菌或细胞样品的制备: 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一,超声 波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。
2. 组织样品的制备: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待 测。
3、血清(浆)样品:按照每 100μL 血清(浆)加入 0.9mL 试剂一的比例充分混匀;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
注意事项:
1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。
2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。
二、测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长 415nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
3、如果用 96 孔板将则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 2μmol/mL 的标准溶液,用微量玻璃比色 则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。
操作步骤:
一、H2O2提取:
1、细菌或细胞样品的制备: 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一,超声 波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。
2. 组织样品的制备: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待 测。
3、血清(浆)样品:按照每 100μL 血清(浆)加入 0.9mL 试剂一的比例充分混匀;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
注意事项:
1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。
2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。
二、测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长 415nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
3、如果用 96 孔板将则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 2μmol/mL 的标准溶液,用微量玻璃比色 则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。
操作步骤:
一、H2O2提取:
1、细菌或细胞样品的制备: 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一,超声 波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。
2. 组织样品的制备: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待 测。
3、血清(浆)样品:按照每 100μL 血清(浆)加入 0.9mL 试剂一的比例充分混匀;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
注意事项:
1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。
2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。
二、测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长 415nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
3、如果用 96 孔板将则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 2μmol/mL 的标准溶液,用微量玻璃比色 则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。
操作步骤:
一、H2O2提取:
1、细菌或细胞样品的制备: 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一,超声 波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。
2. 组织样品的制备: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待 测。
3、血清(浆)样品:按照每 100μL 血清(浆)加入 0.9mL 试剂一的比例充分混匀;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
注意事项:
1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。
2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。
二、测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长 415nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
3、如果用 96 孔板将则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 2μmol/mL 的标准溶液,用微量玻璃比色 则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。
操作步骤:
一、H2O2提取:
1、细菌或细胞样品的制备: 收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一,超声 波破碎细菌或细胞(功率 20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g4℃离心 10min,取上清, 置冰上待测。
2. 组织样品的制备: 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待 测。
3、血清(浆)样品:按照每 100μL 血清(浆)加入 0.9mL 试剂一的比例充分混匀;8000g4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
注意事项:
1、由于试剂一易挥发,试剂一必须先预冷再加,研磨时必须在冰上研磨。
2、本试剂盒中试剂的挥发性较高,请带一次性手套和口罩。
二、测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长 415nm,蒸馏水调零。
2、将试剂二、三和四 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)水浴 10min 以上。
3、如果用 96 孔板将则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 2μmol/mL 的标准溶液,用微量玻璃比色 则用丙酮将 1mmol/mL 标准液稀释为 1μmol/mL 的标准溶液。
相关文献:
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过氧化氢(H2O2)含量检测试剂盒