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单脱氢抗坏血酸还原酶测试盒 辅酶系
产品简介:

储存条件
-20℃
中文名称
单脱氢抗坏血酸还原酶测试盒 辅酶系
有效期
6个月
单位

英文名称
Monodehydroascorbate Reductase(MDHAR) Activity Assay Kit
检测方法
紫外分光光度法 Spectrophotometer
规格
50T/48S

产品型号:BC0650-50T/48S

更新时间:2024-04-24

厂商性质:生产厂家

访 问 量 :1536

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产品介绍

单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
货号:BC0650
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件
提取液液体60 mL×1瓶2-8℃保存
试剂液体30mL×1瓶2-8℃保存
试剂粉剂×12-8℃保存
试剂粉剂×1-20保存
试剂液体×1-20保存

溶液的配制:

  1. 试剂二:临用前加入5 mL蒸馏水充分溶解,2-8℃保存;

  2. 试剂三:临用前加入5 mL蒸馏水充分溶解,可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融;

  3. 试剂四:液体置于试剂瓶内EP管中。临用前加5 mL试剂一充分溶解,可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融。

产品说明:
MDHAR催化MDHA还原生成AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。
MDHAR催化NADH还原MDHA生成AsANAD+,NADH在340nm有特征吸收峰,但是NAD+没有。通过测定340 nm光吸收下降速率,来计算出MDHAR活性。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器用品:
研钵/匀浆器、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、可调式移液枪和双蒸水
操作步骤:“具体操作步骤详见“产品资料"附件"
注意事项:
ΔA测定大于0.3时,建议客户稀释样本或者调整试剂一和上清液的比例(如将400μL试剂一+300μL上清液改为600μL试剂一+100μL上清液)后进行测定。
ΔA测定过小时,建议客户提高样本量或者调整试剂一和上清液的比例(如将400μL试剂一+300μL上清液改为200μL试剂一+500μL上清液)。
A1大于1.5时,建议将样本稀释进行测定。
空白管为检测各管试剂组份的检测孔,正常情况下,其OD值在0.5左右,变化不超过0.01
由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约1mg/mL),所以在测定样品蛋白浓度时需要减去提取液本身的蛋白含量。

实验实例:

  1. 取0.1g橙子果肉加入1mL提取液进行冰浴匀浆。10000rpm,4℃离心10min,取上清置冰上,按照测定步骤操作,测得计算ΔA测定管=A1测定-A2测定=0.827-0.8=0.027ΔA空白管=A1空白-A2空白=0.536-0.532=0.004,按样本质量计算酶活得:

MDHAR 活性(U/g 质量) =0.268×(ΔA测定管-ΔA空白管) ÷W=0.268×(0.027-0.004) ÷0.1=0.06164U/g 质量。
相关发表文献:

  1. Yali Zhou,Sufang Huo,Liting Wang,et al. Exogenous 24-Epibrassinolide alleviates oxidative damage from copper stress in grape (Vitis vinifera L.) cuttings. Plant Physiology and Biochemistry. September 2018;(IF3.404)

相关系列产品:
BC1230/BC1235 抗坏血酸(AsA)含量检测试剂盒
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