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  • 过氧化物酶(POD)生化检测试剂盒
产品名称:

过氧化物酶(POD)生化检测试剂盒

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2022-08-07
过氧化物酶(POD)生化检测试剂盒
检测方法可见分光光度法
POD广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。
试验中所需的仪器和试剂:可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0090
规格50管/48样供货周期现货
主要用途检测样本中的过氧化物酶含量应用领域医疗卫生,环保,化工,生物产业,能源

过氧化物酶(POD)生化检测试剂盒(分光光度法)

货号BC0090

规格50管/48样

 

试剂的组成:

提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;

试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存;

试剂二:液体×2瓶,4℃保存;用时每瓶加入5mL试剂一;用不完的试剂4℃保存一周;

试剂三:液体10 mL×1瓶,4℃保存。

 

测定意义:

    POD(EC 1.11.1.7)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物,具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。POD在有过氧化氢存在的情况下,能使愈创木酚发生氧化,生成茶褐色物质,该物质在470nm有大光吸收。

 

过氧化物酶(POD)生化检测试剂盒

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

 

操作步骤:

  • 粗酶液提取:
  • 细菌、细胞或组织样品的制备:

      细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

     组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

  • 血清(浆)样品:直接检测。
  • 测定步骤和加样表:

试剂名称(µL)

测定孔

试剂一

520

试剂二

130

试剂三

135

蒸馏水

270

样本

15

    测定前将试剂一、二和三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)放置10min。在1mL玻璃比色皿中按顺序加入上述试剂,立即混匀并计时,记录470nm下30s时的吸光值A1和1min30s后的吸光值A2。计算ΔA=A2-A1。

 

三、过氧化物酶(POD)生化检测试剂盒

POD活性计算:

  • 血清(浆)POD活性

单位定义:每mL血清(浆)在每mL反应体系中每分钟A470变化0.01为一个酶活力单位。

计算公式:POD(U/mL)=ΔA×V反总÷V样÷0.01÷T =7133×ΔA

  • 组织、细菌或细胞POD活性
  • 按样本蛋白浓度计算

单位定义:每mg组织蛋白在每mL反应体系中每分钟A470变化0.01为一个酶活力单位。

POD(U/mg prot)=ΔA×V反总÷(V样×Cpr)÷0.01÷T =7133×ΔA÷Cpr

  • 按样本鲜重计算

单位定义:每g组织在每mL反应体系中每分钟A470变化0.01为一个酶活力单位。

POD(U/g 鲜重)=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.01÷T =7133×ΔA÷W

  • 按细菌或细胞密度计算

单位定义:每1万个细菌或细胞在每mL反应体系中每分钟A470变化0.01为一个酶活力单位。

POD(U/104 cell)=ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.01÷T =14.27×ΔA

V反总:反应体系总体积,1.07mL; V样:加入样本体积,0.015mL;V样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,1 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量;500:细菌或细胞总数,500万。

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