土壤中性*白酶活性检测试剂盒 微量法

土壤中性*白酶活性检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC0275
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂二：临用前取1瓶加入6 mL试剂一，沸水浴搅拌溶解后待用，用不完的试剂可以2-8℃保存4周；

2. 标准液：20 μmol/mL 酪*酸溶液。

产品说明：

土壤*白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。土壤中性*白酶在中性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。中性条件下，土壤中性*白酶可将酪蛋白水解产生酪*酸；在碱性条件下，酪*酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝，在680nm有特征吸收峰。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器及用品：
可见分光光度计/酶标仪、可调式移液枪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、微量玻璃比色皿/96孔板、蒸馏水、研钵、30-50目筛。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
当吸光值大于1.5时，建议将上清液用蒸馏水稀释后进行测定，计算时注意乘以稀释倍数。
实验实例：

1. 分别称取2份0.05g森林土样于1.5mLEP管中，分别为对照管及测定管，按照测定步骤操作，使用96孔板测定吸光度，计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.582-0.355=0.227，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤质量计算酶活得：

土壤中性*白酶活性(U/g 土样)=0.05×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.05×0.227÷0.329÷0.05=0.69 U/g 土样。

1. 分别称取2份0.05g三叶草土于1.5mLEP管中，分别为对照管及测定管，按照测定步骤操作，使用96孔板测定吸光度，计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.23-0.177=0.053，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.374-0.045=0.329，按土壤质量计算酶活得：

土壤中性*白酶活性(U/g 土样)=0.05×ΔA测定÷ΔA标准÷W=0.05×0.053÷0.329÷0.05=0.1611 U/g 土样。
相关发表文献：
[1]Manyun Zhang, Jun Wang, Shahla Hosseini Bai, et al. Evaluating the effects of phytoremediation with biochar
additions on soil nitrogen mineralization enzymes and fungi. Environmental Science and Pollution Research. May 2018;(IF2.914)



[2]Zhang M, Wang W, Wang J, et al. Dynamics of biochemical properties associated with soil nitrogen mineralization following nitrification inhibitor and fungicide applications[J]. Environmental Science and Pollution Research, 2017, 24(12): 11340-11348..
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