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专注于生物学试剂及试剂盒领域
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产品型号：BC3005-100T/96S
更新时间：2024-04-19
厂商性质：生产厂家
访 问 量 ：868
010-50973130
产品分类
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土壤全铁含量检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC3005
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
产品说明：
铁元素是一种十分重要的植物营养元素，土壤中铁含量直接影响着植物吸收利用以及生长代谢。在pH 2-9范围内，盐酸羟胺将三价铁转化为二价铁，与邻菲罗琳反应生成橙红色配合物，在510nm有特征吸收峰。通过检测510nm处吸光度变化，可计算出土壤全铁含量。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、天平、马弗炉、坩埚、坩埚钳、台式离心机、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、100目筛和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、取新鲜土样烘干，过100目筛；
2、按照土壤质量（g）：提取剂质量（g）为 1：4的比例（建议称取约0.05g土样，加入0.2g提取剂）缓慢加入提取剂于坩埚中，边加边搅拌均匀；
3、然后在马弗炉中550℃熔融10min；然后在920℃熔融30min；
4、趁热取出坩埚，将熔融物转入烧杯，边搅拌边加2mL提取液，必要时加盖，防止溶液溅出，溶解30min；
5、最后5000g，25℃离心10min，取上清液待测。
二、测定步骤
1、 可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至510nm，分光光度计用蒸馏水调零。
2、 操作表：（在1.5mL EP 管/96孔板中依次加入下列试剂）
试剂名称（μL） | 测定管 | 空白管 |
样本 | 20 | - |
试剂一 | 20 | 20 |
试剂二 | 60 | 60 |
试剂三 | 40 | 40 |
蒸馏水 | 60 | 80 |
充分混匀，置于25℃静置反应20min； | ||
取反应液于微量玻璃比色皿/96孔板中，测定510nm处吸光值A，记为A测定、A空白，计算ΔA测定=A测定-A空白。空白管只需测1-2次。 | ||
三、 土壤全铁含量的计算
1、用微量玻璃比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.1569x -0.0173，R2 = 0.9992
全硼含量（mg/kg）=（ΔA+0.0173）÷ 0.1569×V样总÷W = 25.494×（ΔA+0.0173）÷W
V样总：加入提取液体积，4mL，W：样本质量，g。
2、用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.0785x -0.0173，R2 = 0.9992
全铁含量（mg/kg）=（ΔA+0.0173）÷ 0.0785×V样总÷W = 50.956×（ΔA+0.0173）÷W
V样总：加入提取液体积，4mL，W：样本质量，g。
注意事项：
如果测得吸光值A＞1.5或ΔA＞1.0，建议客户将样本稀释后重新测定，注意计算公式乘上稀释倍数；如果测得吸光值过低或接近空白值，建议客户加大样本量后重新测定，注意同步修改计算公式。
土壤全*检测试剂盒 微量法 土壤全*检测试剂盒 微量法
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