品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC0865 |
规格 | 100T/48S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 测定意义:土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合 |
土壤酸性蛋白酶活
性检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC0865
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体12 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 液体20 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂五 | 液体5 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂六 | 液体15 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体1 mL×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂二:临用前加入10 mL试剂六,沸水浴搅拌溶解后待用,用不完的试剂2-8℃保存1个月;
标准品:20μmol/mL 酪*酸溶液。
产品说明:
土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之一。土壤酸性蛋白酶在酸性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。酸性条件下,土壤酸性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪*酸;在碱性条件下,酪*酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝,在680nm有特征吸收峰。
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液枪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、研钵、蒸馏水、30-50目筛。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项:
当吸光值大于1.5时,建议将上清液用蒸馏水稀释后进行测定,计算时注意乘以稀释倍数。
实验实例:
分别称取2份0.05g土样于1.5mLEP管中,分别为对照管及测定管。按照测定步骤操作,用96孔板测定吸光值,计算ΔA测定= A测定管-A对照管=0.189-0.178=0.016,ΔA标准=A标准管-A空白管=0.374-0.045=0.329,按土壤质量计算酶活得:
土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)= 0.05×ΔA测定÷ΔA标准÷W= 0.05×0.016÷0.329÷0.05= 0.0486 U/g土样。
分别称取2份0.05g森林土于1.5mLEP管中,分别为对照管及测定管。按照测定步骤操作,用96孔板测定吸光值,计算ΔA测定= A测定管-A对照管=0.831-0.612=0.219,ΔA标准=A标准管-A空白管=0.374-0.045=0.329,按土壤质量计算酶活得:
土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)= 0.05×ΔA测定÷ΔA标准÷W= 0.05×0.219÷0.329÷0.05= 0.6657 U/g土样。
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