直接胆*素（DBIL）含量检测试剂盒 微量法

直接胆*素（DBIL）含量检测试剂盒说明书

                                            微量法

货号：BC5175

规格：100T/96S

产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

产品说明：

直接胆*素（Direct bilirubin，DBil）又称结合胆*，是由间接胆红*进入肝后受肝内葡萄糖醛酸基转移酶的作用与葡萄糖醛酸结合生成的。直接胆*素增高对临床诊断阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸、肝癌、胰头癌、胆石症、胆管癌等有重要意义。直接胆*素能被亚*钠氧化，生成胆绿素。通过检测450nm下波长变化，可计算出直接胆*素的含量。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

血清、血浆等液体样本：直接测定。若溶液浑浊，可以离心后取上清进行测定。

二、测定步骤

1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm，分光光度计用蒸馏水调零。

2、 按下表步骤加样：（96孔板或者EP管中加入下列试剂）

三、DBIL含量计算

1、 计算公式

（1）使用96孔板：

DBIL含量（μmol/L）=1495.7×（ΔA测定-ΔA空白）-15.343

（2）使用微量比色皿：

DBIL含量（μmol/L）=1099.7×（ΔA测定-ΔA空白）-10.73

注意事项：

1、胆*素见光易分解，测定时要尽量避光。

2、如果ΔA＜0或过低，建议增加样本量后再进行测定；如果ΔA＞0.5，建议稀释样本后再进行测定。

实验实例：

1、 取非正常小鼠血清按照测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA测定=A1测定-A2测定=0.217-0.170=0.047，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.044-0.044=0，计算含量得：

DBIL（μmol/L）= 1495.7×（ΔA测定-ΔA空白）-15.343=54.95 μmol/L。

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