土壤铵态氮检测试剂盒 微量法

土壤铵态氮含量检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC1515
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：临用前将试剂一A加入试剂一B中混匀备用，或按比例现用现配；避光2-8℃可保存2周。若变色则不能继续使用。

2. 标准品：100 μg/mL NH₄⁺-N标准液。

产品说明：
土壤铵态氮是土壤速效氮的重要组成部分，可以被植物直接吸收利用。铵态氮指标对农业生产具有极其重要的作用。
在强碱介质中，土壤中的铵态氮与次氯酸盐和苯*作用，生成靛酚蓝染料，在630nm处有特征吸收峰，吸光值与铵态氮含量成正比。

技术指标：
低检出限：0.1314 μg/mL
线性范围：0.15625-18 μg/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、振荡器、30~50目筛、研钵、恒温水浴锅。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
按照土样质量（g）：提取液体积（mL）为 1：5~10的比例（建议称取约0.1g新鲜土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，10000g，25℃离心10min，取上清液待测。（土样要求参考注意事项1.2.）
二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至630nm，分光光度计蒸馏水调零。

1. 标准液稀释：临用前取20μL 100μg/mL氮标准液，加入780μL蒸馏水，充分混匀，配制成2.5μg/mL标准液使用，现用现配。（实验中每管需要120μL，为减小实验误差，故配制大体积。）

2. 加样表：

三、计算公式
NH₄⁺-N（μg/g 土样）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准液×V提取÷W=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W
C标准液：标准液浓度，2.5μg/mL；V提取：提取液体积，1mL；W：样本质量，g。


注意事项：

1. 土壤经风干或者烘干很容易引起铵态氮的变化，所以建议采用新鲜土壤进行测定。样品采集后应于4℃下密封运输和保存，并在3d内分析完毕。否则，应于-20℃（深度冷冻）下以小块、小份保存，样品中氨氮可以保存数周。当测定深度冷冻氨氮含量时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在4 h内完成样品解冻、匀质化和提取；如果在4℃下解冻，解冻时间不应超过48 h。

2. 如果要比较不同样本间的铵态氮含量，需将土样烘干，按干重计算后再进行比较。

3. 如果样本吸光值大于1.4，建议将样本用提取液稀释后进行测定

实验实例：

1. 取0.1g三叶草土加入1mL提取液震荡提取1h离心，取上清之后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA测定管=A测定管-A空白管=0.144-0.062=0.082，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.326-0.062=0.264，按样本质量计算含量得：

NH₄⁺-N（μg/g 土样）=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W=2.5×0.082÷0.264÷0.1=7.77 μg/g 土样。

1. 取0.1g林土加入1mL提取液震荡提取1h离心，取上清之后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA测定管=A测定管-A空白管=0.131-0.062=0.069，ΔA标准=A标准管-A空白管=0.326-0.062=0.264，按样本质量计算含量得：

NH₄⁺-N（μg/g 土样）=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W=2.5×0.069÷0.264÷0.1=6.53 μg/g 土样。
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