土壤总磷/有机磷/无机磷含量检测试剂盒

土壤总磷/有机磷/无机磷含量检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2895
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂三：临用前加入4 mL蒸馏水溶解，2-8℃可以保存4周；

2. 试剂四：临用前加入4 mL蒸馏水溶解，2-8℃可以保存4周；

3. 定磷试剂的配制：临用前按试剂二：试剂三：试剂四=1:1:1的体积比配制。配好的定磷试剂应为浅黄色。若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，限当天使用。配制过程中，可能会产生黑色固体，其不影响结果，注意吸取时不要将黑色固体吸入。（注意：配制时最好使用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，或者一次性塑料器皿，以避免磷污染。）

4. 标准品：10 μmol/mL磷标准液。

产品说明：
土壤总磷包括有机磷和无机磷，其中无机磷能够直接被植物利用。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷。同时测定土壤总磷、有机磷和无机磷，可以全面反映土壤磷营养状况。
利用钼蓝法定磷。取一份土样，通过浸提法测定土壤无机磷含量；另外取一份土样，经高温灼烧后，土壤有机磷转化为无机磷，测得土壤总磷含量；总磷含量减去无机磷含量，即可计算出有机磷含量。
技术指标：
低检出限：0.015 µmol/mL
线性范围：0.0323-6.0 µmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、可调式水浴锅、分析天平、可调式移液器、550℃高温电炉、研钵、蒸馏水、30-50目筛、100目筛。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件

一、样本处理：（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1.无机磷：称取通过30-50目筛子的风干土样0.01g，转移到1mL离心管，加入1mL试剂一，震荡混匀，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，离心10min，取上清液一，用于无机磷含量测定。
2.总磷提取：取通过100目筛子的风干土样，550℃灼烧1h，冷却后称取约0.01g，转移到1 mL离心管，加入1mL试剂一，震荡混匀，然后置于45℃水浴1h，8000rpm，离心10min，取上清液二，用于总磷含量测定。
二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。

2. 1μmol/mL 标准溶液的配制：取100μL 10 1μmol/mL磷标准液，加入900μL蒸馏水，充分混匀，配制成1μmol/mL标准液使用，现用现配。

3. 打开水浴锅，调节温度到40℃。

4. 空白管：取EP管，依次加入100μL 蒸馏水，100μL 定磷试剂，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min后于660nm测定吸光度，记为A空白管。空白管只需做1-2次。

5. 标准管：取EP管，依次加入10μL 标准液，90μL 蒸馏水，100μL 定磷试剂，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min后于660nm测定吸光度，记为A标准管。标准管只需做1-2次。

6. 测定管：取EP管，依次加入10μL 上清液一或者上清液二，90μL 蒸馏水，100μL 定磷试剂，混匀后置于40℃水浴保温10min，室温冷却10min后于660nm测定吸光度，记为A测定管。

注意事项：

1. 如果吸光值大于1时，样本需用蒸馏水做相应稀释。

2. 空白管和标准管只需测定1-2次。

3. 需在40min内完成比色。

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