丙酮酸脱羧酶活性检测试剂盒 脂肪酸代谢

丙酮酸脱羧酶活性检测试剂盒 脂肪酸代谢
货号：BC1070
规格：50管/48样
测试方法：紫外分光光度法

注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。
货号: BC1070
规格: 50T/48S

产品内容：
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 36mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 20mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，﹣20℃保存。
试剂四：粉剂×1 瓶，﹣20℃保存。
混合试剂：临用前配制，将试剂三和试剂四用适量试剂二溶解后再全部转移到试剂二中备用。
试剂五：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。

产品说明：
PDC 主要存在于酵母中，是乙醇发酵的关键酶之一，催化丙酮酸脱羧生成乙醛。
PDC 催化丙酮酸脱羧生成乙醛，添加乙醇脱氢酶（ADH）来进一步催化 NADH 还原乙醛生成乙醇和 NAD+；NADH 在 340 nm 有吸收峰，而 NAD+没有；通过测定 340 nm 光吸收下降速率，来计算PDC 活性。

试验中所需的仪器和试剂：
台式离心机、紫外分光光度计、水浴锅、1mL 石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：
一、粗酶液提取：
1、细胞或微生物样品的制备：
先收集细胞或微生物样品到离心管内，弃上清，按照每 500 万细胞或微生物加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（功率 20％，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）。10000rpm，4℃离心 20min，取上清，置冰上待测。
2、组织样品：
称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，冰上充分研磨。16000g 4℃离心 20min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤：
1、 紫外分光光度计预热 30min 以上，调节波长 340nm，蒸馏水调零。
2、 试剂一 37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）水浴提前预热 30min。

相关文献：

《Efficient metabolic evolution of engineered Yarrowia lipolytica for succinic acid production using a glucose-based medium in an in situ fibrous bioreactor under low-pH condition》 作者:Chong Li, Shi Gao, Xiaotong Li, Xiaofeng Yang & Carol Sze Ki Lin  期刊:Biotechnology for Biofuels 影响因子:5.452 PMID:

丙酮酸脱羧酶活性检测试剂盒 脂肪酸代谢 丙酮酸脱羧酶活性检测试剂盒 脂肪酸代谢