乙醇脱氢酶(ADH)活性检测试剂盒 脂肪酸

乙醇脱氢酶（ADH）活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1080
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 提取液：临用前将粉剂一倒入提取液中，溶液为悬浊液，使用前需摇匀；

2. 试剂二：临用取一支加入1.5mL蒸馏水，-20℃分装保存4周，避免反复冻融。

产品说明：
ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶，催化乙醇与乙醛可逆转换，在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成，肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。
ADH催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD⁺，NADH在340nm处有吸收峰，而NAD⁺没有；测定340nm 吸光度下降速率，来计算ADH活性。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
冰、低温离心机、紫外分光光度计、1mL石英比色皿、水浴锅、可调式移液器、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件

实验实例：

1. 取0.1g大鼠肝脏按照提取和测定步骤操作，测得计算ΔA空白管=A1-A2=0.558-0.557=0.001，ΔA测定管=A3-A4=0.812-0.587=0.225，按样本质量计算酶活得：

ADH (U/g 质量) =1.61×(ΔA测定管–ΔA空白管)÷W=1.61×(0.225–0.001)÷0.1=3.6064U/g 质量。

1. 取小鼠血浆直接检测，测得计算ΔA空白管=A1-A2=0.558-0.557=0.001，ΔA测定管=A3-A4=0.708-0.676=0.032，按液体体积计算酶活得：

ADH (U/mL) =1.61×(ΔA测定管–ΔA空白管)=1.61×(0.032–0.001)=0.04991 U/mL。
注意事项：

1. 若A3大于1.5或者A3小于A1，则需要将样本用蒸馏水稀释再进行测定，计算公式注意乘以稀释倍数。

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