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产品名称:

脂肪酶(LPS)活性检测试剂盒 脂肪酸代谢

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-13
脂肪酶(LPS)活性检测试剂盒 脂肪酸代谢
测定意义:LPS 又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS广泛的存在于各种生物中。血清中 LPS 的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC2340
规格50管/48样供货周期现货
主要用途脂肪酶(LPS)活性检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

脂肪酶(LPS)活性检测试剂盒 脂肪酸代谢

产品名称: 脂肪酶(LPS)活性检测试剂盒

产品英文名: Lipase(LPS) Assay Kit

产品货号:BC2340          产地:北京市通州区马驹桥联东U谷8三楼

产品规格:50管/48样       产品商标:solarbio
保存与运输:4℃保存或-20℃保存;            参考价格:420
库存状态:现货                          
关键字: 脂肪酶检测试剂盒|LPS检测试剂盒|脂肪酶|试剂盒

简要介绍:
LPS 又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS广泛的存在于各种生物中。血清中 LPS 的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。 
    LPS 催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算 LPS 活性。

 
产品详细描述
产品内容
试剂一:液体80mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体10mL×1瓶,室温保存。
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存。
标准品:0.06mL×1支。临用前加入1.5 mL无水乙醇,充分溶解配制成125 µmol/mL的油酸标准溶液,4保存。用前注意解冻溶解。

产品说明
LPS又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS广泛的存在于各种生物中。血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。

自备仪器和用品:
    研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯、无水乙醇、冰和蒸馏水。

操作步骤:
一、粗酶液提取:   
组织样品:称取约0.1g样品,加试剂一1.0 mL充分研磨,于4℃,15000rpm离心30min,取上清液待测。
血清样品:直接检测。
二、测定步骤:

  1. 分光光度计预热30min以上,调节波长710nm,甲苯调零。
  2. 试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min以上。
  3. 标准溶液的稀释:将125 µmol/mL的油酸标准溶液稀释为125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9 µmol/mL的标准溶液待测。
  4. 操作表:
加入试剂(mL)空白管测定管标准管
试剂一0.3750.3750.375
试剂二0.1250.1250.125
反复震荡混匀
蒸馏水0.2  
上清液/血清 0.2 
标准溶液  0.2
迅速震荡混匀后置于37℃水浴准确反应10 min
甲苯111
反复震荡混匀后,室温4000rpm离心10 min
取出离心管,小心吸取上层溶液0.9 mL,加入另一2 mL塑料离心管中,按下表操作:
加入试剂(mL)空白管测定管标准管
试剂三0.2250.2250.225

反复震荡混匀;室温4000rpm离心10 min,小心吸取上层溶液800 μL,加入1mL玻璃比色皿,于710nm处测定吸光值。记为A空白管,A测定管,A标准管,计算ΔA测定= A测定管-A空白管,ΔA标准= A标准管-A空白管。
三、LPS活性计算

  1. 标准曲线的绘制:以油酸标准溶液浓度为横坐标,ΔA标准为纵坐标,绘制标准曲线,得到标准方程y=kx+b。将ΔA测定带入方程,得到x(µmol/mL)
  2. 酶活计算:

(1)按蛋白浓度计算:
活性单位定义:37℃中每毫克蛋白每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。
LPS (U/mg prot) =x×V样÷(Cpr×V样) ÷T= 0.1×x÷Cpr
(2)按样本鲜重计算:
活性单位定义:37℃中每克组织每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。
LPS (U/g 鲜重) =x×V样÷(W×V样÷V提) ÷T= 0.1×x÷W
(3)按血清计算:
活性单位定义:37℃中每毫升血清每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。
LPS (U/mL 血清) =x÷T= 0.1×x。
V样:加入反应体系中上清液体积,0.2 mL;Cpr:上清液蛋白质浓度,mg/mL,需要另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒;T:催化反应时间,10 min。W:样本鲜重,g;V提:提取液体积,1mL。
注意事项:
1、甲苯有毒,实验过程中需佩戴手套和口罩。
2、实验过程中须远离火源。
3、当吸光度大于1时,建议将样本稀释后测量。


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