总胆*素（TBIL）含量检测试剂盒 微量法

总胆*素（TBIL）含量检测试剂盒说明书

                                            微量法

货号：BC5185

规格：100T/96S

产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

产品说明：

总胆*素（Total bilirubin，TBil）是直接胆*素和间接胆*素的总和。血清总胆*素的测定是肝、胆功能检查中的一项重要检测项目。能准确地反映黄疸的程度，对临床诊断隐性黄疸有重要意义。在表面活性剂的存在下，总胆*素能被亚*钠氧化，生成胆绿素。通过检测450nm下波长变化，可计算出总胆*素的含量。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

血清、血浆等液体样本：直接测定。若有浑浊可以离心后取上清进行测定。

二、测定步骤

1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至450nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、 按下表步骤加样（在EP管或者96孔板上加入下列试剂）：

三、TBIL含量计算

1、 计算公式

（1）使用96孔板：

TBIL含量（μmol/L）=874.67×（ΔA测定-ΔA空白）+10.699

   （2）使用微量比色皿：

TBIL含量（μmol/L）=491.98×（ΔA测定-ΔA空白）+18.478

注意事项：

1、胆*见光易分解，测定时要尽量避光。

2、控制ΔA测定在0.01-1.5之间，如果低于或者超过可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

实验实例：

1、 取非正常小鼠血清按照测定步骤操作，用96孔板测得计算ΔA测定=A1测定-A2测定=0.271-0.148=0.13，ΔA空白=A1空白-A2空白=0.051-0.048=0.003，计算含量得：

TBIL（μmol/L）= 874.67×（ΔA测定-ΔA空白）+10.699=121.78 μmol/L。

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