中性木聚糖酶活性检测试剂盒 糖代谢

中性木聚糖酶（NEX）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2590
规格：50T/24S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：
标准品：10mg木糖。临用前加入667μL蒸馏水配成100μmol/mL的标准品溶液，2-8℃保存8周。
产品说明：
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生，能催化水解木聚糖，也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶，可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖，降低酿造中物料的粘度，促进有效物质的释放，以及降低饲料中的非淀粉多糖，促进营养物质的吸收利用，因而广泛的应用于酿造和饲料工业中，中性木聚糖酶（NEX）一般分离自最适生长pH为6-8的微生物。
NEX在中性环境中催化木聚糖降解成还原性寡糖和单糖，在沸水浴条件下进一步与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应，在540nm处有特征吸收峰，反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比，通过测定反应液在540nm吸光值增加速率，可计算NEX活力。


注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
低温离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
吸光度变化应该控制在0.01~1.2之间，否则加大样本量或稀释样本，注意同步修改计算公式中的稀释倍数。实验实例：

1. 取0.1193g蓝莓加入1mL缓冲液进行匀浆研磨，取上清用蒸馏水稀释40倍后按照测定步骤操作，用比色皿测得ΔA测定=A测定- A对照=0.497-0.458=0.039，带入标曲y=0.32x-0.1474（R²=0.9982），计算x=0.5825，按样本质量计算NEX活性得：

NEX活力（U/g 质量）= x÷W÷30×F =0.5825÷0.1193÷30×40=6.510 U/g 质量。

1. 取泡菜汁离心取上清用蒸馏水稀释2倍后按照测定步骤操作，用比色皿测得ΔA测定=A测定-A对照=0.474 -0.081=0.393，带入标曲y=0.32x-0.1474（R²=0.9982），计算x=1.689，按发酵液计算NEX活力得：

BAX活力（U/mL）= x÷T×F =1.689÷30×2=0.113U/mL。
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