欢迎光临北京索莱宝科技有限公司网站!
销售咨询热线:
13720003930
您的位置: 网站首页 > 产品中心 > 生化检测试剂盒-常量法 > 糖代谢系列 > BC2580β-半乳糖苷酶(β-GAL)测试盒 糖代谢
  • β-半乳糖苷酶(β-GAL)测试盒 糖代谢
产品名称:

β-半乳糖苷酶(β-GAL)测试盒 糖代谢

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-13
β-半乳糖苷酶(β-GAL)测试盒 糖代谢
β-GAL分解对-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有Z大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC2580
规格50管/24样供货周期现货
主要用途β-半乳糖苷酶(β-GAL)测试应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

β-半乳糖苷酶(β-GAL)测试盒 糖代谢
货号:BC2580
规格:50管/24样
测试方法:可见分光光度法

测定意义:                          
    β-GAL(EC 3.2.1.23)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,能够催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷键水解,此外还具有转半乳糖苷的作用。β-GAL不仅可为植物的快速生长释放储存的能量,还能在正常的多糖代谢、细胞壁组分代谢以及衰老时细胞壁降解过程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖残基的水解,释放自由的半乳糖。

测定原理:
    β-GAL分解对-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有大吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GAL活性。

自备用品:
    可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

产品内容

提取液:液体50mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:粉剂×1 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入5mL 蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂仍-20℃保存。

试剂二:液体15mL×1 瓶,4℃保存。

试剂三:液体80mL×1 瓶,4℃保存。

标准液:液体1ml×1支,4℃保存,10μmol/ml对硝基苯酚溶液。

操作步骤:

一、 粗酶液提取:

1、 细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为500~1000:1 的比例(建议500 万细菌或细胞加入1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30 次);15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2、 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

   标准液的处理:用试剂二将标准液稀释200、100、50、25、12.5、6.25、0nmol/ml

二、 测定步骤:

1、 分光光度计预热30min 以上,调节波长400nm,蒸馏水调零。

 样本测定(在EP 管中依次加入下列试剂):

试剂名称(μL)

测定管

对照管

标准管

试剂一

200

 

 

蒸馏水

 

200

 

试剂二

250

250

 

样本

50

50

 

迅速混匀,放入37℃准确水浴30min

标准液

 

 

500

试剂三

1000

1000

1000

充分混匀,400nm 处测定吸光值A,计算ΔA=A 测定-A 对照。每个测定管需设一个对照管。

三、 β-GAL 活性计算:

根据标准管的吸光度(x)和浓度(y,nmol/ml)建立标准曲线,将△A带入标准曲线中,计算样品生成的产物量(nmol/ml)。

(1) 按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg 组织蛋白每小时产生1nmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

β-GAL 活力(nmol/h /mg prot)=(y×V 反总)÷(V 样×Cpr)÷T

=20×y÷Cpr

需要另外测定,建议使用本公司BCA 蛋白质含量测定试剂盒。

(2) 按样本鲜重计算:

单位的定义:每g 组织每小时产生1nmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

β-GAL 活力(nmol/h /g 鲜重)=(y×V 反总)÷(W×V 样÷V 样总)÷T

=20×y ÷W

(3) 按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1 万个细菌或细胞每小时产生1nmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

β-GAL 活力(nmol/h /104 cell)= (y×V 反总)÷(500×V 样÷V 样总)÷T

=0.04×y

Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;V 反总:反应体系总体积,0.5mL;V 样:加入反应体系中样本体积,0.05mL;V 样总:加入提取液体积,1mL;W:样本质量,g; 500:细胞或细菌总数,500 万;T:反应时间,0.5h。

相关文献:

 《Exosomes from hyperglycemia-stimulated vascular endothelial cells contain versican that regulate calcification/senescence in vascular smooth muscle cells》 作者:Shuang Li?, Jun-Kun Zhan?, Yan-Jiao Wang, Xiao Lin, Jia-Yu Zhong, Yi Wang, Pan Tan, Jie-Yu He, Xing-Jun Cui, Yi-Yin Chen, Wu Huang and You-Shuo Liu 期刊:Cell & Bioscience 影响因子:3.405 PMID:30622695
《Apple fruit acidity is genetically diversified by natural variations in three hierarchical epistatic genes: MdSAUR37, MdPP2CH and MdALMTII》 作者:Dongjie Jia,Fei Shen,Yi Wang,Ting Wu,Xuefeng Xu,Xinzhong Zhang,Zhenhai Han 期刊:Plant Journal 影响因子:5.726 PMID:29750477
《Genistein protects against ox-LDL-induced senescence through enhancing SIRT1/LKB1/AMPK-mediated autophagy flux in HUVECs》 作者:Huaping ZhangEmail authorXiaorong YangXuefen PangZhenxiang ZhaoHaixia YuHui Zhou 期刊:Molecular and Cellular Biochemistry 影响因子:2.884 PMID:30443855
《Possible role of β-galactosidase in rheumatoid arthritis.》 作者:Zhipeng Su, Jingjing Gao, Qing Xie, Yanping Wang & Yunsen Li 期刊:Mod Rheumatol 影响因子:1.973 PMID:31269834
《Micro-RNA335-5p targeted inhibition of sKlotho and promoted oxidative stress–mediated aging of endothelial cells》 作者:Yixin Liu, Peng Lai, Juelin Deng, Qiukui Hao, Xinyi Li, Ming Yang, Hui Wang & Birong Dong 期刊:Biomark Med 影响因子:2.268 PMID:30785341

 

β-半乳糖苷酶(β-GAL)测试盒 糖代谢订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。


运输说明:

1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7