山*醇脱氢酶活性检测试剂盒 糖代谢

山*醇脱氢酶（SDH）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2530
规格：50T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一：取10 mL试剂五加入1瓶试剂一粉剂中溶解，再加入一支试剂四，现用现配，24 h变质；

2. 标准品：临用前加入1.4 mL蒸馏水，即10 μmol/mL NADH标准品。-20℃保存4周，避免反复冻融。

产品说明：
SDH（EC 1.1.1.14）催化山*醇脱氢生成果糖，是调控生物体内山*醇含量的关健酶之一。SDH催化山*醇脱氢生成果糖，同时还原NAD⁺生成NADH，生成的NADH能将电子传递给NBT生成紫色的甲臜，根据这一原理可以计算SDH活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、超声破碎仪，1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
1. ΔA大于0.7时，建议将样本用提取液稀释后测量，计算公式中乘以稀释倍数。
2.测定过程中样本和工作液在冰上放置，以免变性和失活。
3.比色皿中反应液的温度必须保持37℃或25℃，取小烧杯一只装入一定量的37℃或25℃蒸馏水，将此烧杯放入37℃或25℃水浴锅中。在反应过程中把比色皿连同反应液放在此烧杯中。
参考文献：
Aguayo M F, Ampuero D, Mandujano P, et al. Sorbitol dehydrogenase is a cytosolic protein required for sorbitol metabolism in Arabidopsis thaliana[J]. Plant science, 2013, 205: 63-75.
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