品牌 | SOLARBIO/索莱宝 |
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TEV蛋白酶 怎么储藏
货号:TEVDAB-1000U
规格:1000u
品牌:solarbio
别名 : rTEV
英文名称 : rTEV
储存条件 : -70℃/-20℃
单位 : 支
外观(性状) : 冻干粉
产品说明:
rTEV蛋白酶(重组型)是经过基因工程改造后的重组蛋白酶,该酶特异性识别Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe- Gln-Gly七氨基酸序列。rTEV蛋白酶与肠激酶U(EK)、Thrombin、Factor Xa、SUMO等蛋白酶相比,具有高活性、高特异性的双重特点,rTEV蛋白酶因具有高剪切活性和特异性,已成为融合蛋白表达后去除融合tag的*蛋白酶。该酶经6×His标签纯化而得(含组氨酸标签),纯度达99%,剪切反应完毕后可通过Ni-NTA Resin(Cat.No.P2010, Solarbio)去除。该酶在2-8℃-30℃温度、pH范围(6.0-8.5)反应条件下均具有活性
活性定义: 在1XrTEV Buffer(50 mM,pH8.0, 0.5 mM EDTA, 1mM DTT),30℃反应1h,剪切>85%的3 μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。
保存条件: 长期储存-70℃,可储存1年,-20℃,可储存6个月。
该酶经 6×His 标签纯化而得(含组胺酸标签),纯度达99%, 剪切反应完毕后可通过His标签纯化树脂Ni-NTA Resin(Cat.No. P2010)去除,以达到纯化目的蛋白的目的。
表1. 不同温度下rTEV酶切活性
反应时间 | 不同温度下剪切活性(%) | |||
4°C | 16°C | 21°C | 30°C | |
1 h | 34 | 58 | 56 | 70 |
2 h | 58 | 80 | 78 | 90 |
3 h | 71 | 99 | 99 | 99 |
3.5h | 84 | 99 | 99 | 99 |
影响天然TEV酶活性的常见因素:1)PMSF和AEBSF(1 mM),TLCK(1 mM),Bestatin(1 mg/ml)、Pestatin A(1 mM),EDTA(1 mM)以及E-64(3 mg/ml),以上这些蛋白酶抑制剂对rTEV的活性没有影响;2)Zn离子(>5 mM)对rTEV活性有抑制;3)与半胱氨酸反应的试剂也是rTEV的潜在抑制剂。
表达方式: A DNA sequence encoding the TEV Protease (NP_062908) (Gly 2038- Gly 2280) was fused with polyhistidine tag at the N-terminus, with a Ser 2256 Asn mutation
种属:Human
表达宿主: E.Coli
QC Testing
纯度:> 95%, as determined by SDS-PAGE
内毒素:< ﹤1.0 EU per 1μg cytokine as determined by the LAL method.
稳定性:Samples are stable for up to twelve months from date of receipt -70°C
预测N端: Met 1
分子量:The recombinant human TEV protease consists of 251 amino acids and has a predicted molecular mass of 28.6 kDa. As estimated in SDS-PAGE under reducing conditions.
缓冲液: Supplied as a 0.2μm filtered solution of 50mM Tris, 10%Sucrose,5mM DTT pH8.0
SDS-PAGE:
Usage Guide
储存方法:Store it under sterile conditions at -70℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage and usage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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