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  • 植物氨态氮检测试剂盒 氮代谢系列
产品名称:

植物氨态氮检测试剂盒 氮代谢系列

产品品牌: 索莱宝 价格: 900
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-11
植物氨态氮检测试剂盒 氮代谢系列
氮素是构成生物体的一种必需元素。铵态氮进入植物细胞后形成氨基酸或酰胺,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,在 570 nm 有特征吸收峰;通过测定570 nm 吸光度,来计算氨基酸含量。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC1520
规格50管/48样供货周期现货
主要用途植物氨态氮检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

植物氨态氮检测试剂盒 氮代谢系列

植物氨态氮含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
英文名称:Plant ammonia nitrogen content detection kit
关键词:植物氨态氮|植物氨态氮检测|植物氨态氮测定|氨态氮
注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。

货号:BC1520
规格:50T/48S

产品内容:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:粉剂×1 瓶,4℃保存,临用前将试剂三倒入使其充分溶解备用。该试剂溶解后 10 天内有效。
试剂二:粉剂×2 瓶,4℃避光保存。临用前加 2mL 蒸馏水充分溶解。
试剂三:液体 45mL×1 瓶,4℃保存。
标准品:粉剂×1 支,10mg 半胱氨酸,4℃避光保存。临用前加入 1.157mL 提取液,得到 1000μg/mL氮标准液。

产品说明:
氮素是构成生物体的一种必需元素。铵态氮进入植物细胞后形成氨基酸或酰胺,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。
氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,在 570 nm 有特征吸收峰;通过测定570 nm 吸光度,来计算氨基酸含量。

试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器无水乙醇、冰和蒸馏水。

操作步骤:
一、粗酶液提取:
按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL 提取液)加入提取液,室温匀浆后于 25℃,12000g 离心 10min,取上清待测。
二、测定步骤:
1、 分光光度计预热 30min 以上,调节波长 570nm,蒸馏水调零。
2、 将 1000μg/mL 氮标准液用提取液分别稀释为 200、100、50、25、12.5μg/mL。
3、 操作表:
试剂名称(μL) 测定管 标准管 空白管
样本              50     -       -
标准品            -      50      -
蒸馏水            -       -      50
试剂一            500    500    500
无水乙醇          500    500    500
试剂二             50     50     50
混匀后盖紧瓶盖封口膜封口(防止水分散失),置于沸水浴中保温 10 min,冷却后反复颠倒 EP管数次,将测定管 8000rpm 离心 5min 后取上清,于 570nm 测定吸光值。显色后务必在 30min 内测完。计算△A=A 测定管-A 空白管,△A 标准=A 标准管-A 空白管。
三、植物氨态氮含量计算:
1、标准曲线的绘制
以各个氮标准液为横坐标,其对应的△A 标准为纵坐标,建立标准曲线,得到标准方程 y=kx+b,将△A 带入方程中,得到 x (µg/mL)
2、NH3-N 含量的计算
(1)按样本鲜重计算
NH3-N 含量(µg /g FW)=x×V 提取÷W= x÷W。
(2)按蛋白浓度计算
NH3-N 含量(µg/mg prot)=x×V 提取÷(Cpr×V 提取)= x÷Cpr。
W:样品质量,g;
Cpr:蛋白浓度,mg/mL;
V 提取:样品提取液总体积,1mL。
注意事项:
为保证实验结果的准确性,需先取 1-2 个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于 1),用提取液稀释后再测定。

相关文献:
《SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses》 作者:Fu-Yuan Zhu,Mo-Xian Chen,Wai-Lung Chan,Feng Yang,Yuan Tian,Tao Song,Li-Juan Xi,Ying Zhou ,ShiXiao,Jianhua Zhang,Clive Lo 期刊:Journal of Proteomics 影响因子:3.537 PMID:30048775

植物氨态氮检测试剂盒 氮代谢系列

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