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  • 植物氨态氮检测试剂盒 氮代谢系列
  • 植物氨态氮检测试剂盒 氮代谢系列
产品名称:

植物氨态氮检测试剂盒 氮代谢系列

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-04-08
储存条件
2-8℃
中文名称
植物氨态氮检测试剂盒 氮代谢系列
有效期
6个月
单位

英文名称
Plant Ammonium Nitrogen Content Assay Kit
检测方法
可见分光光度法 Spectrophotometer
规格
50T/48S
自备试剂
该试剂盒实验过程中需自备试剂,详情见网站说明书

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS详询
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC1520
规格50管/48样供货周期现货
主要用途植物氨态氮检测应用领域环保,化工,生物产业,农业,综合

植物氨态氮含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

货号:BC1520

规格:50T/48S

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称

规格

保存条件

提取液

液体60 mL×1

2-8℃保存

试剂一

粉剂×1

2-8℃保存

试剂二

粉剂×2

2-8℃保存

试剂三

液体45 mL×1

2-8℃保存

标准品

粉剂×1

2-8℃保存

溶液的配制:

1、 试剂一:临用前将试剂三倒入使其充分溶解备用。该试剂溶解后10天内有效。

2、 试剂二:临用前加2 mL蒸馏水充分溶解。

3、 标准品:10 mg半*氨酸,临用前加入1.157 mL提取液,得到1000 μg/mL 氮标准液。

产品说明:

氮素是构成生物体的一种必需元素。氨态氮进入植物细胞后形成氨基酸或酰胺,植物组织氨氮含量可反映植物受胁迫的程度。

氨基酸的α-氨基可与水合茚三酮反应,产生蓝紫色化合物,在570nm有特征吸收峰;通过测定570nm吸光度,来计算氨基酸含量。

技术指标:

低检出限:5.5847 μg/mL

线性范围:25-300 μg/mL

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、无水乙醇、冰和蒸馏水。

操作步骤

一、样本处理可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献

按照质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,室温匀浆后于25℃12000g离心10min,取上清待测。

二、测定步骤

1. 分光光度计预热30min以上,调节波长至570nm,蒸馏水调零。

2. 1000μg/mL 氮标准液用提取液分别稀释为3002001005025μg/mL

 

3. 操作表:

试剂名称(μL

测定管

标准管

空白管

样本

50

-

-

标准品

-

50

-

提取液

-

-

50

试剂一

500

500

500

无水乙醇

500

500

500

试剂二

50

50

50

混匀后盖紧瓶盖封口膜封口(防止水分散失),置于沸水浴中保温10min,冷却后反复颠倒EP管数次,将测定管8000rpm离心5min后取上清,于570nm测定吸光值。显色后务必在30min内测完。计算ΔA=A测定管-A空白管,ΔA标准=A标准管-A空白管。

三、植物氨态氮含量计算

1. 标准曲线的绘制:

以各个氮标准液为横坐标,其对应的ΔA标准为纵坐标,建立标准曲线,得到标准方程y=kx+b,将ΔA带入方程中,得到xμg/mL)。

2. NH3-N含量的计算:

1)按样本质量计算:NH3-N含量(μg/g 质量=x×V提取÷W=x÷W

2)按蛋白浓度计算:NH3-N含量(μg/mg prot=x×V提取÷Cpr×V提取)=x÷Cpr

W:样本质量,gCpr:蛋白浓度,mg/mLV提取:样本提取液总体积,1mL

注意事项:

为保证实验结果的准确性,需先取1-2个样做预实验,如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

相关发表文献:

[1] Fuyuan Zhu,Moxian Chen,Wailung Chan,et al. SWATH-MS quantitative proteomic investigation of nitrogen starvation in Arabidopsis reveals new aspects of plant nitrogen stress responses. Journal of Proteomics. September 2018; (IF3.537)

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