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产品名称:

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液

产品品牌: 索莱宝 价格: 840
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-11-21
抗酒石酸酸性磷酸酶染色液
酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)分布极广泛,遍布各种组织,主要存在于细胞的溶酶体内,所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。各种动物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶的适宜 pH 为 4.5~5.5。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号G1492
规格4×10ml供货周期现货
主要用途酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)分布极广泛,遍布各种组织,应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液

 

产品说明:
酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)分布极广泛,遍布各种组织,主要存在于细胞的溶酶体内,所以常作为溶酶体标志酶。溶酶体外的酸性磷酸酶存在于内质网和胞质内。各种动物中的酸性磷酸酶各有不同,酸性磷酸酶的适宜 pH 为 4.5~5.5。存在于正常人肺泡巨噬细胞和白血病人脾脏的抗酒石酸酸性磷酸酶(Tartrate-resistnt acid phosphatase,TRAP)均在细胞滤泡中,并不是释放入血液。血液中的 TRAP 绝大多数来源于破骨细胞,因此可以通过测量血液中的 TRAP 了解破骨细胞的功能状态。

以萘酚 AS-BI 为底物,在酸性 pH 下被酸性磷酸酶水解释放出磷酸和萘酚,萘酚与重氮盐偶联生成有色产物,定位于细胞质中,若细胞内的 ACP 有抗酒石酸的活性,则呈阳性反应。该染色液可用于新鲜血涂片、细胞涂片,亦可用于冰冻切片、石蜡切片。
自备材料:
1、 蒸馏水、恒温箱
2、 载玻片、推玻片
3、 光学显微镜
操作步骤(仅供参考):
(一)血液、细胞涂片:
1、 推片:取新鲜血液或骨髓涂片置于载坡片上,推玻片于载玻片保持 30 度,置于血液或细胞滴液的正前方,稍往后移不血液或细胞滴液接触使后者沿推片下缘散开,再匀速沿载玻片平面平稳向前滑动铺满血膜为止。
2、 自然晾干,TRAP 固定液 4℃固定 30s~3min,多数情况下 30~60s 即可。
3、 水洗,稍微晾干(不易过分干燥)。
4、 切片入 TRAP 孵育液,置于 37℃温箱,避光浸染 45~60min,水洗。
5、 复染:苏木素染色液染色 5min 或甲基绿染色液染色 2~3min。
6、 水洗、晾干、镜检。
(二)冰冻切片:
1、 冰冻切片回温 37℃,水中浸泡 1~2min。
2、 自然晾干,TRAP 固定液 4℃固定 1~3min。
3、 水洗,稍微晾干(不易过分干燥)。
4、 切片入 TRAP 孵育液,置于 37℃温箱,避光浸染 45~60min,水洗。
5、 复染:苏木素染色液染色 5~8min 或甲基绿染色液染色 2~3min。
6、 水洗、晾干、镜检。
(三)石蜡切片:
1、 石蜡切片脱蜡 5~10min,重复一次。
2、 无水乙醇 5min,90%乙醇和 70%乙醇各 2min。
3、 水洗 2min。
4、 自然晾干,TRAP 固定液 4℃固定 30s~3min,多数情况下 30~60s 即可。
5、 水洗,稍微晾干(不易过分干燥)。
6、 切片入 TRAP 孵育液,置于 37℃温箱,浸染 45~60min,水洗。
7、 复染:苏木素染色液染色 5~8min 或甲基绿染色液染色 2~3min。
8、 水洗、晾干、镜检。
染色结果:
阳性颗粒 紫红色
细胞核 蓝色(苏木素)或绿色(甲基绿)

临床意义:
1、 毛细胞白血病的毛细胞 ACP 染色呈强阳性或中度阳性,且不被酒石酸抑制,其他细胞均呈阴性或极弱阳性。
2、 急性白血病幼单核细胞 ACP 染色呈阳性,原淋巴细胞呈弱阳性,原粒细胞对 ACP 反应不一。
3、 T 淋巴细胞 ACP 染色呈阳性,颗粒粗大、分布密集。B 淋巴细胞呈阴性或颗粒细小的弱阳性。
4、 戈谢细胞呈强阳性,尼曼-皮克细胞呈阴性或弱阳性。

注意事项:
1、 TRAP 孵育液易失效,本法宜用皮肤穿刺血涂片,晾干后应及时染色
2、 对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
3、 样本需新鲜,取材后应立即处理,否则会影响酶的活性。
4、 组织固定需在 4℃冰箱进行,时间不宜超过 24h,否则酶活性会减弱或消失。
5、 组织在石蜡包埋时,温度不宜高于 56℃。应使用熔点为 52~54℃的石蜡进行浸蜡,浸蜡时间要短,否则酶活性会减弱或消失。
6、 不纯的二甲苯会分解黑色沉淀,宜选用 AR 级以上的二甲苯。
7、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

抗酒石酸酸性磷酸酶染色液

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