品牌 | SOLARBIO/索莱宝 |
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产品简介:
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2清除系统中具有重要作用。
H2O2在240nm下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应S-CAT活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容:
试剂一:液体×5瓶,4℃保存;临用前每瓶加入9.9mL蒸馏水充分溶解后待用。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入2mL蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存。
试剂三:液体×1瓶,4℃保存。
操作步骤:
试剂名称 | 测定管 | 无基质管 | 无土管 |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 |
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试剂一(μL) | 1000 |
| 1000 |
双蒸水(μL) |
| 1000 |
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振荡培养20min | |||
试剂二(μL) | 25 | 25 | 25 |
混匀8000g,常温离心5min,取全部上清 | |||
试剂三(μL) | 120 | 120 | 120 |
混匀,用蒸馏水调零,240nm处记录各管A值。
注意:每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做一管。
S-CAT活力的计算:
单位的定义:每天每g风干土样催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CAT(U/g)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷(ε×d)×106]÷W÷T=18.9×(A无土管-A测定管+A无基质管)
V反总:反应体系总体积,1.145×10-3L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;T:反应时间,20min=1/72d;W:样本质量,0.1g。