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  • 二胺氧化酶测试盒
产品名称:

二胺氧化酶测试盒

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-01-18
二胺氧化酶测试盒:DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC1285
规格100管/48样供货周期现货
主要用途二胺氧化酶活性测定

二胺氧化酶测试盒 微量法

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC1285

规格:100T/48S

 

产品内容:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。

试剂一:液体 0.25mL×1 支,4℃保存。

试剂二:液体 2mL×1 管,4℃保存。

试剂三:液体 1mL×1 管,4℃保存。

 

产品说明:

    DAO(EC1.4.3.6)广泛存在于动物(肠粘膜、肺、肝脏、肾脏等)、植物和微生物中。催化多胺氧化为醛,其活性与核酸和蛋白合成密切相关,能够反映肠道机械屏障的完整性和受损伤程度。

    DAO催化尸胺产生醛和过氧化氢,外源添加过量的辣根过氧化物酶,催化过氧化氢氧化邻

联茴香胺生成氧化型邻联茴香胺,在460nm处有特征吸收峰,通过测定该波长吸光度增加速率,计算DAO活性。

 

自备实验用品及仪器:

    天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、蒸馏水。

 

操作步骤:

一、粗酶液提取:

1. 组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g4℃离心20min,取上清,置冰上待测。

2. 细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

3. 血清等液体:直接测定。

 

二、测定操作表:

1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长460nm,蒸馏水调零。

2、操作表

 

对照管

测定管

粗酶液(μL

50

50

提取液(μL

128

108

试剂一(μL

2

2

试剂二(μL

20

20

试剂三(μL

 

20

混匀,37℃水浴30min,微量石英比色皿/96孔板,蒸馏水调零,测定460nm吸光值。ΔA=A测定-A 对照

 

三、酶活性计算公式:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

1)按样本蛋白浓度计算:

     酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。

    DAO 活性(nmol/min/mg prot=A460÷ε×d×V 反总÷V ×Cpr÷T= 18×A 460 ÷Cpr

2)按样本质量计算:

    酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

     DAO 活性(nmol/min/g=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷V 样总×W÷T= 18×A 460 ÷W

3)按细胞数量计算:

     酶活性定义: pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

DAO 活性(nmol/min/104cell=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷V 样总×细胞数量)÷T= 18×A460 ÷细胞数量

 (4) 按液体体积计算

     酶活性定义: pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

    DAO 活性(nmol/min/mL=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷T= 18×A460

    ε:氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L/mmol/cmd:比色皿光径,1cmV 反总:反应总体积,0.2mLV 样:反应中样本体积,0.05mLV 样总:加入提取液体积,1mLCpr

    样本蛋白浓度,mg/mLW:样本质量,gT:反应时间,30min

b.  96 孔板测定的计算公式如下

1)按样本蛋白浓度计算:

    酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量为一个酶活力单位(U)。

    DAO 活性(nmol/min/mg prot=A460÷ε×d×V 反总÷V ×Cpr÷T= 36×A 460 ÷Cpr

2)按样本质量计算:

     酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每克组织每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

    DAO 活性(nmol/min/g=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷V 样总×W÷T= 36×A460÷W

3)按细胞数量计算:

      酶活性定义: pH7.2,温度为37℃条件下,每104个细胞每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

DAO 活性(nmol/min/104cell=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷V 样总×细胞数量)÷T   = 36×A460÷细胞数量

(4) 按液体体积计算

     酶活性定义:在pH7.2,温度为37℃条件下,每毫升血清每分钟催化产生1nmol H2O2所需的酶量定义为一个酶活力单位。

    DAO 活性(nmol/min/mL=A460÷ε×d×V 反总÷V ÷T= 36×A460

    ε :氧化型邻联茴香胺毫摩尔消光系数:7.5 L /mmol/cmd96 孔板光径,0.5cmV 反总:

    反应总体积,0.2mLV 样:反应中样本体积,0.05mLV 样总:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW:样本质量,gT:反应时间,30min

 

注意事项:

 1、如果OD值小于0.01,适当加大提取用样本量;OD值大于0.8,粗酶液可适当稀释,或者减少提取用样本量。

    2、样品蛋白质含量需要另外测定。

 

二胺氧化酶测试盒订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。


运输说明:

极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。

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