2019-929
抗体洗脱液的原理介绍日益增长的抗体使用,研究目的蛋白种类一日千里,那么膜的再使用能够节约研究时间,推进研究进程,在不影响实验准确的前提下,那么在使用的意义是很明显的。现在这里我来讲一下抗体洗脱液--strippingbuffer。在介绍抗体洗脱液的原理前,先来看看抗原抗体结合的一些环境条件吧,通常我们的抗体稀释液选择是:TBST和PBST,这里的两种抗体稀释液的pH值均在7.4-7.8之间。那么问题就来了,为什么抗体稀释液的pH值是这样的呢?抗原抗体的结合反应:抗原与抗体能够...
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2019-927
简述tbst与pbst的区别及配置TBST是TBS+Tween的缩写,生物实验中提到的PBST是指PBS溶液加上Tween-20。那么tbst与pbst都有上面区别呢?tbst与pbst的区别:1、TBST的pH值随温度变化大一点,而PBST似乎容易有沉淀,若稀释抗体后需要反复使用的话建议使用TBST溶解。2、两种洗液用起来没有什么区别,都是提供一个缓冲的PH值环境,加上吐温20有助于蛋白的洗脱。PBST的磷酸盐缓冲液加Tween-20,而TBST是Tris缓冲液加Tween...
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2019-920
WesternBlot内参抗体选择原则内参抗体种类很多,比如beta-actin、beta-tubunlin、GAPDH、α-tubunlin等,那么针对自己的实验,我们该如何选择呢?下面简单介绍下选择内参抗体应遵循的原则:一.样本种属来源:先要考虑的就是实验样本来源于什么物种。1、哺乳动物的组织或者细胞样本,通常选择β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB、HistoneH3、Na,Katpase等。2、植物来源实验样本,则可以选择plantactin、...
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2019-919
Tris的主要应用及缓冲能力Tris中文名称:三(羟甲基)氨基甲烷英文名称:Tris;Tris(Hydroxymethyl)aminomethaneTris是一种有机化合物,白色微黄色结晶性粉末或块,化学式C4H11NO3,溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、苯,不溶于四氯化碳。25°C时溶解度(mg/mL):水550、乙二醇79.1、甲醇26、无水乙醇14.6、95%乙醇22.0、N,N-二甲基甲酰胺14,戊醇2.6,丙醇2.0,乙酸乙酯0.5、环己烷0.1。水溶液不吸收二氧化碳...
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2019-918
2019-917
2019-916
果胶酶的化学性质及用途介绍果胶酶广泛分布于高等植物和微生物中,本质上是聚半乳糖醛酸水解酶,果胶酶水解果胶主要生成β-半乳糖醛酸,可用次碘酸钠法进行半乳醛酸的定量,从而测定果胶酶活力。果胶酶的化学性质:一般为灰白色粉末,或棕黄色液体。商业用果胶酶的有效成分主要有三种酶。一种是果胶甲酯酶(Pectinpectylhydrolase)(EC3.1.1.11),主要作用为催化甲酯果胶以脱去甲酯基,产生聚半乳糖醛酸苷键和甲醇。另一种是聚半乳糖醛酸酶(Polygalacturonase;...
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2019-912
几种感受态细胞的用途、基因型和特点1、DH5菌株用途:克隆菌,用于分子克隆、质粒提取。基因型:supE44△lacU169(?80lacZ△M15)hsdR17recAlendAlgyrA19thi-1relAl特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘性平板的抑制型菌株.其?80lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recAl和endAl的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒的提取。2、0菌株用途:克隆菌,用于分子克隆,...
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