几种磷酸缓冲液的配制方法

磷酸缓冲液也叫做磷酸盐缓冲液，英文名为PhosphateBuffer，是生物化学研究中使用为广泛的一种缓冲液，磷酸缓冲液的配制我们一起来了解一下。先，按照下表所给定的体积，混合1mol/L的磷酸二氢钠(单碱)和1mol/L磷酸氢二钠(双碱)贮液，获得所需pH的磷酸缓冲液。配制1mol/L的磷酸二氢钠(NaH2PO4?H2O)贮液：溶解138g于足量水中，使终体积为1L;1mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)贮液:溶解142g于足量水中使终体积为1L。1mol/L磷酸二氢钠(...

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磷酸缓冲液的作用

磷酸缓冲液也叫磷酸盐缓冲液，是生物化学研究中使用为广泛的一种缓冲液，磷酸盐缓冲液是由磷酸二氢钠和磷酸氢二钠组成的溶液，那么磷酸缓冲液具体有哪些作用呢?磷酸缓冲液的作用有哪些?磷酸缓冲液主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值，以便让实验的化学反应在佳条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工，如食品或者饲料真菌毒素检验中Elisa方法的洗板应用或者食品微生物检验中的稀释缓冲液。磷酸缓冲液的作用不仅仅如此，仅伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释...

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MTT实验原理

MTT是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT实验原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值(OD值)，来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强(如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小)。该方法已广泛用于...

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MTT配制以及注意事项

MTT全称为3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazoliumbromide，又称噻唑蓝。用于细胞增殖及细胞活性测定和对体外细胞的细胞毒性的测定。MTT的原理检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臢（Zā）（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臢（Zā），用酶标仪在490nm波长处(英文说明书写的是570nm）测定其...

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MTT法检测细胞活性步骤及原理

要知道MTT法检测细胞活性步骤先要知道MTT是什么？MTTMTT是一种粉末状化学试剂，全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide，汉语化学名为3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝。是一种黄颜色的染料。MTT法检测细胞活性原理检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此...

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琼脂糖凝胶电泳常见问题

琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品，如大分子核酸、病毒等，一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。琼脂糖凝胶电泳常见为题都有哪些？、一、DNA带模糊、1、DNA降解：琼脂糖凝胶电泳试验中要避免核酸酶污染2、电泳缓冲液陈旧：电泳缓冲液多系使用后，离子强度降解，PH值上升，缓冲能力减弱，从而影响电泳实验，建议经常更换电泳缓冲液。3、所用电泳条件不合适：电泳时电压不应超过20V/cm，温度4、DNA上扬量过多：应减少凝胶中DNA上样量。...

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琼脂糖凝胶电泳条件

琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法.其分析原理与其他支持物电泳的主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大大提高了分辨能力。但由于其孔径相当大，对大多数蛋白质来说其分子筛效应微不足道，现广泛应用于核酸的研究中。琼脂糖凝胶电泳条件电泳缓冲液的pH在6~9之间，离子强度0.02~0.05为...

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琼脂糖凝胶电泳缓冲液配制

琼脂糖凝胶具有网络结构，物质分子通过时会受到阻力，大分子物质在涌动时受到的阻力大，因此在凝胶电泳中，带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量，而且还取决于分子大小，这就大大提高了分辨能力。在琼脂糖凝胶电泳缓冲液又几种适用于天然双链DNA的电泳。琼脂糖凝胶电泳缓冲液配置常见琼脂糖凝胶电泳缓冲液配制（如图）TBE通常作为5×或10×的贮存液配制和贮存。这种浓的贮存液pH应为8.3左右，它在应用前稀释，并用同一种贮存液制备凝胶溶液和琼脂糖凝胶电泳缓冲液。上述三种电泳缓冲液都比较好...

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