酸性转化酶(AI)的活性计算如下:
标准条件下测定的回归方程为y=0.0016x-0.001;x为标准品浓度(µg/mL),y为吸光值。
(1)按蛋白浓度计算
单位定义:37℃每mg蛋白每分钟产生1µg还原糖定义为一个酶活性单位。
NI活性(U/mg prot)=[(ΔA+0.001)÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr)÷T=20.8×(ΔA+0.001) ÷Cpr
(2)按鲜重计算
单位定义:37℃每g组织每分钟产生1µg还原糖定义为一个酶活性单位。
NI活性(U/g)=[(ΔA+0.001)÷0.0016×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=20.8×(ΔA+0.001) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.2mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;T:反应时间:30min。