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琼脂糖凝胶的相关知识普及

发布日期: 2022-03-18
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  琼脂糖凝胶来源于一种海藻多糖琼脂,是一种天然凝胶,不是共价交联,所以氢键交联的键能比较弱。它与葡聚糖不同,孔隙度是以改变琼脂糖浓度而达到的。
  
  凝胶的化学稳定性不如葡聚糖凝胶。凝胶没有干胶,必须在溶胀状态保存,除丙酮和乙醇外,凝胶遇脱水剂、冷冻剂和一些有机溶剂即被破坏。用凝胶进行分离操作的适宜工作条件是pH4.5-9、温度0-40℃。凝胶对硼酸盐有吸附作用,不能用硼酸缓冲液。
  
  琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构,网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下,它的结构是稳定的,可以在许多条件下使用(如水,pH4-9范围内的盐溶液)。凝胶在40℃以上开始融化,也不能高压消毒,可用化学灭菌活处理。
  
  凝胶颗粒的强度很低,操作时必须十分小心。另外,由于琼脂糖颗粒弹性小,柱高引起的压力能导致变形,造成流速降低甚至堵塞,所以装柱时应设法对柱压进行调整。
  
  凝胶没有带电基团,所以对蛋白类物质的非特异性吸附力明显小于葡聚糖凝胶。在介质离子浓度>0.1mol/L时已不存在明显吸附。
  
  琼脂糖凝胶的特征是能分离几万至几千万高分子量的物质,分离范围随着凝胶浓度上升而下降,颗粒强度却随浓度上升而提高,特别适用于核酸类、多糖类和蛋白类物质的分离,弥补了聚丙烯酰胺凝胶和葡聚糖凝胶的不足,扩大了应用范围。
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