植物蛋白提取试剂盒可从新鲜、冰冻或干燥植物组织中提取可溶性植物蛋白。适用于多种植物及植物的不同部位(如根、茎、叶、花、种子等)的蛋白提取,提取效率高、蛋白产量大、活性高、速度快。
所提蛋白可直接进行蛋白电泳分析、免疫沉淀、WesternBlot、蛋白活性测定及蛋白纯化等实验。所提蛋白可用BCA蛋白定量试剂盒(ZJ101)进行浓度的测定。
植物蛋白提取试剂盒操作说明:
由于A组分溶解较慢,所以实验前需要提前从冰箱中取出溶解待使用!取适量的A组分,按照B组分与A组分1:100的比例进行配置好裂解缓冲液。
一、植物细胞样品蛋白提取
1、离心收集植物细胞,按照每5~10×105细胞加入100-200μL的裂解缓冲液的比例。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触,在冰上裂解5-10min。
2、充分裂解后,10000-14000g离心5min,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
二、对于植物原生质体样品
1、把组织剪切成细小的碎片,制备原生质体。(可选)质粒转化原生质体,继续培养16-48h,并可以根据需要给予适当的实验条件处理。
2、100-500g低速离心收集原生质体。
3、按照每5~10×105原生质体加入100-200μL的裂解缓冲液。轻弹管底以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的原生质体沉淀。如果原生质体量较多,必需分装成5~10×105原生质体/管,然后再裂解。