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核酸提取是浓度越高越好吗?

发布日期: 2022-12-20
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  分子诊断是以核酸作为检测对象,主要应用于临床实验室各类疾病的诊断中,如肿瘤、感染、遗传等,而核酸提取是分子诊断实验的“开始”。
  
  几乎所有实验均是以核酸提取为基础,无论后续的克隆、PCR、qPCR、建库、测序等都需要核酸提取以后才能顺利进行。核酸提取纯化质量是保证核酸检测数据准确性的前提,也是分子诊断行业发展的前提。
  
  核酸提取又叫核酸提取纯化,简单点就是裂解+纯化。裂解就是通过温度以及试剂将样本中的核酸游离在裂解液体系的过程。纯化就是使核酸与裂解体系中的其他杂质成分比如蛋白质,盐等彻底分离的过程。
  
  核酸的检测方法:检测核酸质量的方法有很多,实验室常见的方法就是凝胶电泳、紫外分光光度计、PCR扩增。
  
  PCR与电泳到底谁强?
  
  众所周知,土壤核酸提取很容易失败,原因在于土壤通常是富含腐殖酸以及腐殖酸类似物。核酸提取的过程中,如果杂质去除的不干净就会直接影响下游的PCR实验。
  
  曾有人说,你看我土壤提取的浓度多高,但是一做PCR扩增就发现电泳一片“漆黑”,新手总是百思不得其解。
  
  其实很容易理解,因为核酸提取后的电泳图只能辅助我们判断提取的核酸的浓度,并不能成为检测核酸质量的标准。要想判断核酸提取的成功,做PCR扩增是直接、简单的方式。
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