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人抗胰蛋白酶elisa试剂盒的样本处理及要求

发布日期: 2022-12-26
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  人抗胰蛋白酶elisa试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠丙二醇(SDA)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。
  
  人抗胰蛋白酶elisa试剂盒样本处理及要求:
  
  一、血清
  
  将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
  
  二、血浆
  
  用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
  
  三、组织匀浆
  
  用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
  
  推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂,加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。然后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
  
  四、细胞培养物上清或其它生物标本
  
  请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
  
  五、注意
  
  标本溶血会影响检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
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