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荧光染料在流式细胞检测技术中的分类

发布日期: 2023-02-01
浏览人气: 530
  在流式细胞检测技术发展的几十年中,荧光成为了其发展轨迹上重要代名词之一。在流式细胞检测实验中,应用各种荧光素标记抗体是必不可少的。那么常用的流式荧光染料有哪些呢?
  
  一、有机小分子
  
  这类染料是具有历史、应用广泛且相对较小的荧光化合物。有了国外研究基础,国内公司也陆续开始拥有自己专属染料。
  
  二、藻胆蛋白
  
  从各种藻类中提取的大蛋白分子。与化学合成荧光染料相比,藻胆蛋白荧光量子产率超过90%、具备相对高的消光系数,且能够发出强烈荧光信号。
  
  在聚合物染料没出现之前,PE和APC是亮的染料,也是搭配低丰度抗原选择。不过,藻胆蛋白很容易受光漂白影响,因此不推荐长时间或反复暴露于激发源的应用。
  
  三、串联染料
  
  一个具有供体染料分子的激发和受体染料分子的发射性质的独特荧光基团。利用荧光共振能量转移(FRET)的现象,即两个荧光分子中供体的发射光谱与受体的激发光谱重叠,且位置上距离很近时,会产生能量的转移情况,此时供体荧光分子的荧光信号发生淬灭,而受体荧光分子的荧光强度显著增强。
  
  比起单分子染料,串联染料不仅在荧光亮度上明显增强,还可在单一激发器中实现更大的发射波长,使得检测红外区域的光谱成为可能。一个激发光源就可以使用多个染料进行研究,这依赖于串联染料扩展斯托克斯位移值(150-300nm),即激发与发射波长的差值。
  
  随着科研、IVD领域技术势头飞速发展,仪器不断地迭代更新,流式细胞检测技术手段已经十分成熟,仅仅单激光、单通道的流式分析,已经不能满足科研人员需求,目前的单激光、多通道流式检测技术,无论在免疫疗法、细胞分选、生物制药等其它领域都受到高度青睐。
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