采血、分离动物血清是疫病监测、检测、诊断和评估免疫效果的一项前提性工作,血清分离质量的好坏,直接影响到监测结果,所以掌握畜禽的采血分离血清的方法尤为重要。
一、常用血液采集方法选择
1、一次性注射器采集
采血量达到采血管容积的1/3为宜,不要超过2/3,使其凝固后自然析出血清,操作不当容易引起溶血。
2、真空采血管(抗凝剂)
可达到快速分离血浆的目的。
3、真空采血管(促凝剂)
可以使血清分离快,分离血清多不易受外界温度的影响。还可以减少溶血现象的发生,真空采血管内涂有硅酮防止红细胞黏附于试管壁,如果使用普通的试管,红细胞附于试管壁离心时红细胞碎裂易溶血。
二、动物血清的分离
1、采集血液样品后,倾斜30-45度角放置好。
2、夏天在常温下即可,冬天要在20-30℃下静置30-45分钟,以利血清析出,或者先放在温水中静置30分钟后再进行血清分离,否则不易析出血清。
3、在分离过程中,血样不可剧烈摇晃以免溶血,条件允许可用离心机4000转/分转速下离心10分钟或8000转/分速度下离心3-5分钟立即分离得到血清,不能立即分离的需及时置于25℃以上的地方过夜以便析出血清,将析出血清转移至新的EP管内送检血清。
三、动物血清分离注意事项
1、血清分离的时候,有时把血液离心后会出现血清变成胶冻样,可能有以下几点原因:采血后放置时间不够;动物个体差异;采血时间应在采食前或采食后2小时以后;室温低,当出现胶冻时可以将胶冻于血凝块分离,将胶冻放于温度35°左右的温箱内一段时间胶冻会自动化开或用玻璃棒挤压胶冻也可析出血清。
2、在采血过程中一定要注意如果用一次性真空管时血液应不间断地流入管中,一旦血流间断要另换管,否则不易析出血清。
3、溶血的血清,会影响实验结果的准确性,应剔除。