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简述瑞士-姬姆萨染色液的步骤

发布日期: 2016-04-21
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瑞氏-姬姆萨染色液是利用Romanowsky??Stain?技术原理改良而成的。主要应用于血液和骨髓涂片染色。姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,着色清晰,色泽纯正,但是对胞核着色偏深,核结构显示较差。
瑞氏-姬姆萨染色液原理
瑞氏-姬姆萨染色液主要应用于血液和骨髓涂片染色,它是利用Romanowsky??Stain?技术原理改良而成的。细胞的着色过程是染料透入被染物并存留其内部的一种过程,此过程既有物理吸附作用,又有化学亲和作用。各种细胞及细胞的各种成分由于其化学性质不同,对瑞氏-姬姆萨染色液中的酸性染料(曙红)和碱性染料(亚甲蓝)的亲和力也不一样。因此,标本涂片经瑞氏-姬姆萨染色液染色后,相应各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态特征的目的。
使用方法:
本产品可作为多种组织或细胞的染色使用,不同组织、细胞,不同的用途可以有不同的使用方法。具体方法请根据自己需求参考既有文献,本产品以涂片为例,举例说明,仅供参考。
1、取涂片、自然干燥。
2、滴加瑞氏-姬姆萨染液2-3滴覆盖整个标本涂片,染1-2分钟。
3、滴加等量的0.01M磷酸氢二钠溶液,轻轻晃动玻片, 与瑞氏-姬姆萨染色液充分混匀,染色3-5分钟。
4、水洗、吸干、镜检。
5、染色后胞浆和胞核的染色清晰分明,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆呈浅红色,胞浆中颗粒区分明显。
注意事项:
1、涂片厚薄适宜,涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。
2、所加染液不能过少,以免蒸发而使染料沉淀。冲洗时间不能过久,以防脱色。
3、染色对pH十分敏感,稀释染液必须用缓冲液,冲洗用水应接近中性,否则可能会导致细胞染色异常,形态难以识别,甚错误。
4、 染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。

瑞氏-姬姆萨染色液是由碱性染料美蓝( Methvlem blue )和酸性染料黄色伊红( Eostm Y )合称伊红美蓝 染料即瑞氏(美蓝-伊红Y)染料。伊红钠盐的有色部分为阴离子,无色部分为阳离子,其有色部分为酸性,故称伊红为酸性染料。美蓝通常为氯盐是碱性的,美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐,其有色部分为阳离子,无色部分为阴离子,恰与伊红钠盐相反。

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