2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠 BCA蛋白定量

2,2-联喹啉-4,4-二甲酸二钠 BCA蛋白定量
货号：PC0022
规格：1g/瓶
说明： 蛋白定量

有效期 1年

英文名称 BCA

CAS 979-88-4

分子式 C20H10N2Na2O4· xH2O

分子量 388.28

储存条件 2-8℃

纯度 Purity≥98%

外观（性状） 白色淡黄色粉末

单位 瓶

蛋白定量

产品简介：
碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+， Cu+与BCA试剂形成紫蓝色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA, EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
操作说明：
一. 微孔酶标仪法
1. 配制工作液：根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品：取10μL BSA标准品用PBS稀释100μL（样品一般可用PBS稀释），使终浓度为0.5mg/mL。将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20μL加到96孔板的蛋白标准品孔中，加PBS补足20μL。
3. 将样品作适当稀释（多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20μL到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量样品时误差偏大，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
4. 各孔加入200μL BCA工作液，37℃放置15-30分钟。用酶标仪测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
二. 分光光度计法 如没有酶标仪，可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。 步骤如下：
1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工作液室温24小时内稳定。
2. 稀释标准品：取100μL BSA标准品用PBS稀释1mL（样品一般可用PBS稀释），使终浓度为0.5mg/mL。
3. 取八支（或者更多）5mL离心管，标上号，按下表加入试剂。

参考文献：

《Endometrial mesenchymal stem cells isolated from menstrual blood repaired epirubicin-induced damage to human ovarian granulosa cells by inhibiting the expression of Gadd45b in cell cycle pathway》 作者:Zhongrui Yan?, Fengyi Guo?, Qing Yuan?, Yu Shao?, Yedan Zhang?, Huiyan Wang?, Shaohua Hao and Xue Du authorView ORCID ID profile 期刊:Stem Cell Research & Therapy 影响因子:4.963 PMID:30606243

《Isoquercitrin, a flavonoid glucoside, exerts a positive effect on osteogenesis in vitro and in vivo》 作者:JingLiabXuxiaWangacYingziWangabChengyanLudDehuaZhengabJunZhangab 期刊:Chemico-Biological Interactions 影响因子:3.296 PMID:30365939

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