通用 RT-PCR 试剂盒（AMV）

通用 RT-PCR  试剂盒(AMV)
货号：RP1200
规格：50T/100T
保存：-20℃保存，避免反复冻融，复检期为 1 年。

产品内容：

产品简介：
    本试剂盒适用于各种 RNA 制品的反转录反应以及随后的 PCR 扩增。它采用 AMV 进行反转录反应，能够获得更长的反转录产物。同时，在 20ul 反转录体系和 50ul PCR 反应体系中，还可以一次性得到足够量的 PCR 产物用于后续的克隆实验。
    本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT 酶采用进口的 AMV，所以 cDNA 更长，基因的信息保留得更完整！ 反转录过程中特异的 RNase 抑制剂可有效降低由于外源 RNase 污染而导致实验失败的风险。 本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于 cDNA 克隆及目的基因检测等分子生物学实验。

操作步骤：
一、反转录反应
1、在冰浴的无 RNase 的离心管中加入如下反应成分：

2-5ug 总 RNA 或 50-500ng mRNA
2ul Oligo(dT) 16 或 2 pmole基因特异性引物
补RNase-free ddH 2 O 14.5ul

2、65℃保温 5min 后迅速在冰上冷却 2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：

2ul 10×AMV Buffer
1ul dNTPs
0.5ul RNasin
1ul AMV
1ul DTT

3、42℃温浴 60min，如果是用随机引物，请先将离心管置 25℃温浴 10min，再 42℃温浴 60min。

4、95℃加热 5min 终止反应，置冰上进行后续实验或-20℃保存。

二、PCR  反应
1、按以下各组分配制 50ul PCR 反应体系：

10×PCR Buffer 5ul
MgCl 2  4ul
dNTPs 1ul
上游引物（用户自备 10um） 1ul
下游引物（用户自备 10um） 1ul
RT 反应产物 1-2ul
Taq Polymerase 0.5ul
ddH 2 O x ul
Total Volume 50ul

2、混匀后短暂离心，PCR 仪扩增，琼脂糖凝胶电泳观察结果。

注意事项：
1、 用于 cDNA 合成反应的相关试剂和耗材尽可能用 DEPC 进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。
2、 RNA 样品要避免反复多次冻融，应使 RNA 在冰浴中处于融化状态。

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通用 RT-PCR  试剂盒(AMV)订购说明：
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通用 RT-PCR  试剂盒(AMV)运输说明：
1、极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
2、低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
3、常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。