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  • BCA  微量蛋白浓度测定试剂盒
产品名称:

BCA 微量蛋白浓度测定试剂盒

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-03-23
BCA 微量蛋白浓度测定试剂盒

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝

BCA  微量蛋白浓度测定试剂盒说明书
货号:PC0050
规格:500 微孔(500T)/1000 微孔(1000T)/2000 微孔(2000T)
保质期:本试剂盒自订购之日起一年内有效。
产品内容:
包装 500  微孔 1000  微孔 2000  微孔 保存
BCA 试剂 100ml 2×100ml 4×100ml 室温
Cu 试剂 3ml 6ml 12ml 室温
PBS 稀释液 30ml 60ml 120ml 室温
BSA 蛋白标准 (5mg/ml BSA) 0.3ml 0.5ml 1ml -20℃
产品简介:
碱性条件下,蛋白将Cu 2+ 还原为Cu + , Cu + 与BCA试剂形成紫颜色的络合物,测定其在 562nm处的吸收
值,并与标准曲线对比,即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检
测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。实验中,若发现样品稀释
液或裂解液本身背景值较高,可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
操作说明:
一 . 微孔酶标仪法
1. 配制工作液: 根据标准品和样品数量,按 50 体积 BCA 试剂加 1 体积 Cu 试剂(50:1)配制成 BCA
工作液,充分混匀(混合时可能会有浑浊,但混匀后就会消失)。BCA 工作液室温 24 小时内稳定。
2. 稀释标准品:先用 PBS 将 BSA 标准品稀释终浓度为 0.8mg/ml 备用。再依次稀释 80、40、20、
10、5、2.5ug/ml.。
3. 高浓度蛋白可将样品作适当稀释(多做几个梯度,如作 2 倍、4 倍、8 倍稀释) ,由于移液器
在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线 1/2 后。
4. 各孔加入 200 微升 BCA 工作液和 40ul 稀释后的蛋白或标准品溶液,对照孔加入 PBS 稀释液。37
℃放置 4 小时。用酶标仪测定 A562nm,根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时,应注意防止因水
分蒸发影响检测结果。
二 . 分光光度计法
如没有酶标仪,在离心管中混匀样品后加入比色皿,用分光光度计比色。
采用分光光度计测定蛋白浓度方法与酶标仪法相似, 只需要按照分光光度计比色皿容量要求按照比例
配置相应的 BCA 工作液和标准品溶液。
常规比色皿用量为 200ul 有样本加入 1mlBCA 工作液或 400ul 样本加入 2mlBCA 工作液。微量比色皿
用量为 20 样本加入 100ul BCA 工作液。或根据仪器情况自行调整。
附:样本及标准品稀释示意图
样本管号  A  B  C  D  E
PBS 稀释液用量  180  100  100  100  ……
标准品用量  20(原液) 100(从 A 管吸出) 100(从 B 管吸出) 100(从 C 管吸出) ……
终浓度(ug/ml) 80  40  20  10  ……
注意事项:
1. 长期不用时,Cu 试剂与 PBS 稀释液可置于 2-8℃保存,如发现细菌污染则应丢弃。BCA 试剂在低
温条件下出现结晶沉淀时,可 37℃温育使其*溶解, 不影响使用。
2. 样品中若含有较多干扰物质时,请采用 Bradford 蛋白浓度测定试剂盒。
3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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