通用 RT-PCR 试剂盒（M-MLV）

通用 RT-PCR  试剂盒(M-MLV)
货号 ：RP1100
规格：25T/50T/100T
保存 ：-20℃保存，避免反复冻融，复检期为 1 年。

产品内容 ：

产品简介：

  本试剂盒适用于各种 RNA 制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。 它采用M-MLV 进行反转录反应，能够获得较长的反转录产物。同时，在 20ul 反转录体系和 50ul PCR 反应体系中，还可以一次性得到足够量的 PCR 产物用于后续的克隆实验。
  本试剂盒中配置的酶均为进口的酶。RT 酶采用进口的 M-MLV，所以 cDNA 更长，基因的信息保留得更完整！ 反转录过程中特异的 RNase 抑制剂可有效降低由于外源 RNase 污染而导致实验失败的风险。 本试剂盒使用方便、快捷，可广泛用于 cDNA 克隆及目的基因检测等分子生物学实验。

操作步骤 ：
一、反转录反应
1、在冰浴的无 RNase 的离心管中加入如下反应成分：
  1-5ug 总 RNA 或 50-500ng mRNA
  2ul Oligo(dT) 16 或 2 pmole 基因特异性引物
  补 RNase-free ddH 2 O 14.5ul
2、70℃保温 5min 后迅速在冰上冷却 2min，简短离心收集反应液后加入以下各组分：
  4ul 5×M-MLV Buffer
  1ul dNTPs
  0.5ul RNasin
  1ul M-MLV
3、42℃温浴 60min，如果是用随机引物，请先将离心管置 25℃温浴 10min，再 42℃温浴 60min。
4、用 RNase-free ddH2O 将反应体系稀释到 50ul，取 2-5ul 进行 PCR 反应。
二 、PCR  反应
1、按以下各组分配制 50ul PCR 反应体系：
  10×PCR Buffer 5ul
  dNTPs 1ul
  上游引物（用户自备 10um） 1ul
  下游引物（用户自备 10um） 1ul
  RT 反应产物 2ul
  Taq Polymerase 0.5ul
  ddH 2 O x ul
  Total Volume 50ul
2、混匀后短暂离心，PCR 仪扩增，琼脂糖凝胶电泳观察结果。

注意事项 ：
1、 用于 cDNA 合成反应的相关试剂和耗材尽可能用 DEPC 进行处理，并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时，首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后，再将溶液进行过滤除菌处理。
2、 试剂盒的各组分应在-20℃保存，避免反复冻融，有效期 12 个月。
3、 RNA 样品要避免反复多次冻融，应使 RNA 在冰浴中处于融化状态。

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通用 RT-PCR  试剂盒(M-MLV)订购说明：
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通用 RT-PCR  试剂盒(M-MLV)运输说明：
极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入索莱宝的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
低温产品：低温产品运输过程中加装索莱宝冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入索莱宝的箱子（保温效果少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。