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  • 人骨髓单个核细胞分离液试剂盒
产品名称:

人骨髓单个核细胞分离液试剂盒

产品品牌: 索莱宝 价格: 700
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2020-04-01
人骨髓单个核细胞分离液试剂盒
货号:P5050
规格:3×100ml/kit
保存:室温避光储存,有效期少 2 年。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号P5050
规格200ml/KIT供货周期现货
主要用途本品用于分离人骨髓单个核细胞。应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

人骨髓单个核细胞分离液试剂盒
货号:P5050
规格:3×100ml/kit
保存:室温避光储存,有效期少 2 年。


试剂盒内容:

全血及组织稀释液 100ml
细胞洗涤液 100ml
试剂C 100ml
试剂E 100ml
试剂F 100ml
说明书 1 份


一、  各种动物骨髓细胞的采集方法
    1. 大鼠、小鼠骨髓的采集:用颈椎脱臼法处死动物,剥离出胸骨或股骨,用注射器吸取少量的F 液,冲洗出胸骨或股骨中全部骨髓液,以500g(约1800 转/分)离心20 分钟,弃上清。沉淀以F 液重复洗涤一次后用含20%胎牛血清的全血及组织稀释液悬起(细胞浓度为2×10 8 -1×10 9 个/ml),备用。
   2. 大动物骨髓的采集:
    A.骨髓穿刺点定位
   (1)胸骨:穿刺部位在胸骨中线,胸骨体与胸骨柄连接处,或选胸骨上1/3 部。
   (2)胫骨:穿刺部位在胫骨内侧,胫骨上端的下方1 厘米处。
   (3)肋骨:穿刺部位在第5~7 肋骨各自的中点上。
   (4)髁骨:穿刺部位在髁前上棘后2~3 厘米的髁嵴。
   (5)股骨:穿刺部位在股骨内侧面,靠下端的凹面处。

 

B.骨髓穿刺方法
   (1)实验动物按要求固定,穿刺部位去毛、消毒、麻醉,要求局部麻醉范围直达骨膜,也可作全麻。
   (2)操作人员带消毒手套,确定穿刺点,估计从皮肤到骨髓的距离并依此固定骨髓穿刺针长度。左手拇、食指绷紧穿刺点周围皮肤,右手持穿刺针在穿刺点垂直进针,小弧度左右旋转钻入,当有落空感时表示针尖已进入骨髓腔。用左手固定穿刺针,右手抽出针芯,连接注射器缓慢抽吸骨髓组织,当注射器内抽到少许骨髓时立即停止抽吸,收集骨髓细胞加入4-5ml F 液混匀,以500g(约1800 转/分)离心20 分钟,弃上清,沉淀以F 液重复洗涤两次后用含20%胎牛血清的全血及组织稀释液悬起(细胞浓度为2×10 8 -1×10 9 个/ml),备用。
   (3)左手压住穿刺点周围皮肤,迅速拔出穿刺针,用棉球压迫数分钟。如穿刺的是肋骨,除压迫止血外,还需胶布封贴穿刺点,防止发生气胸。

 

3. 人骨髓的采集:
   临床方法收集骨髓细胞加入4-5ml F液混匀,以500g(约1800转/分)离心20分钟,弃上清,沉淀以F液重复洗涤两次后用含20%胎牛血清的全血及组织稀释液悬起(细胞浓度为2×10 8 -1×10 9 个/ml),备用。


二、骨髓淋巴细胞分离方法
    1.取1ml 骨髓细胞悬液与E液按1:1比例混合再与1份全血及组织稀释液混匀置20℃-30℃下自然沉降20-30分钟。吸取浑浊的上清部分,弃去底部红细胞备用。
    2. 取浑浊的上清部分液体小心叠加在C 液之液面上(比例为1:1),20℃±2℃,400g(约1500 转/分),离心20 分钟(半径15cm 水平转子)。
     此时离心管中由上下细胞分四层。*层;为稀释液层。第二层;为环状乳白色含所需单个核细胞层。
     第三层;为透明分离液层。第四层;为极少红细胞层。收集第二层细胞放入含细胞洗涤液4-5 毫升的试管中,充分混匀后,以500g(约1800 转/分)离心20 分钟。沉淀经反复洗涤2 次即得所需单个核细胞。
    注: 提取率约为80%。
    分离图例:


三、  注意事项
     A. 本分离液是敏光型的,在运输和贮藏过程中应在18℃-25℃避光保存,启封后置4℃保存避免微生物污染。另外,本品为真空包装,未启封前置于10℃ 以下易出现白色结晶,影响分离效果。
    B. 待分离的骨髓要求新鲜,避免冷冻和冷藏。分离液和所分离样本一定在20℃水浴箱中复温20 分钟保证分离液和所分离样本温度在20℃±2℃时分离效果好,且所有操作过程一定要在无菌条件下进行。
    C. 由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数,调节离心的时间,摸索的分离条件(具体分离条件各实验室自定)。
    D. 好使用无静电反应的离心管,推荐使用未经过碱处理的玻璃离心管。


四、产品性能指标

pH 7.0-7.5
渗透压 280-340mOsmol/kg
内毒素 ≤0.5EU/ml
无菌 直接接种培养14 天后培养基澄清
澄明度及不溶性颗粒物 每50ml 溶液中含10μm 以上的不溶性微粒20 粒以下,
含25μm 以上的不溶性微粒5 粒以下


五、贮藏及保存期限
    18℃-25℃避光保存,有效期两年。启封后置4℃保存,有效期一周。
    注:若保证无微生物污染,启封后可置4℃长期保存。但应注意保存温度较低时本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。

 

人骨髓单个核细胞分离液试剂盒订购说明:

1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。 
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。 
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。 
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。

 

参考文献:
《Increased MCL-1 expression predicts poor prognosis and disease recurrence in acute myeloid leukemia》 作者:Xi-xi Li, Jing-dong Zhou, Xiang-mei Wen, Ting-juan Zhang, De-hong Wu, Zhao-qun Deng, Zhi-hui Zhang, Xin-yue Lian,Pin-fang He,Xin-yu Yao,Jiang Lin,Jun Qian 期刊:Onco Targets Ther? 影响因子:3.046 PMID:31118680

《High expression of PIM2 induces HSC proliferation in myelodysplastic syndromes via the IDH1/HIF1?α signaling pathway》 作者:Zhaoyun Liu, Mengyue Tian, Kai Ding ,Hui Liu, Yangyang Wang, Rong Fu 期刊:Oncol Lett. 影响因子:1.871 PMID:31186757

 

 

 

 

 

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