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  • 脱氢抗坏血酸还原酶活性测定试剂盒 维生素C
产品名称:

脱氢抗坏血酸还原酶活性测定试剂盒 维生素C

产品品牌: 索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-06
脱氢抗坏血酸还原酶活性测定试剂盒 维生素C
货号:BC0660
规格:100管/96样
测试方法:微量法
DHAR 存在于线粒体、细胞质和叶绿体中。DHAR 催化 GSH 还原 DHA 生成 AsA,调控细胞 AsA/DHA 比值,是抗坏血酸-谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶。提高植物体内的DHAR 活性,可提高植物食品中 AsA 含量,进而提高植物食品的营养品质。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC0660
规格50管/24样供货周期现货
主要用途脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性检测试剂应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

脱氢抗坏血酸还原酶活性测定试剂盒 维生素C


测定意义:
    DHAR 存在于线粒体、细胞质和叶绿体中。DHAR 催化 GSH 还原 DHA 生成 AsA,调控细胞 AsA/DHA 比值,是抗坏血酸-谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶。提高植物体内的DHAR 活性,可提高植物食品中 AsA 含量,进而提高植物食品的营养品质。


测定原理:
    DHAR 催化 GSH 还原 DHA 生成 AsA, 通过测定 DHA 被还原量可计算得 DHAR 活性。


实验中所需仪器及设备:
研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计、1ml 石英比色皿、可调式移液器、双蒸水。


试剂组成和配制:

试剂一×1 瓶,稀释液一×1 支,临用前配制,取少量双蒸水充分溶解试剂一后,加稀释液一
0.381ml,再继续加双蒸水定容 50ml ;
试剂二×1 瓶,加 50ml 双蒸水充分溶解;
试剂三×1 支,临用前加 5.5ml 双蒸水充分溶解;
试剂四×1 瓶,临用前加双蒸水 5.5ml 充分溶解。


样品前处理:
    称取约 0.1g 样品,加试剂一 1ml,冰上充分研磨,16000g 4℃离心 20min,取上清。


DHAR 测定操作:

按下表操作:

 空白管测定管
试剂二(ml)0.7 0.7 
试剂三(ml)0.10.1
试剂四(ml)0.10.1
双蒸水(ml)0.1/
提取液(ml)/0.1


迅速混匀后,于 265nm 比色,记录 30s 和 150s 的吸光值,空白管和测定管吸光值分别记为
A1、A2 和 A3、A4。


DHAR 活性计算:
     DHAR 活力单位定义:每毫克蛋白每分钟氧化 1μmol AsA 为 1U。
计算公式:DHAR(U/mg prot)= △A265/min×[10 6 /(ε•d)]×(V 总/V 样)/Cpr
= [(A4-A3)-(A2-A1)÷2]×[10 6 ÷(5.42×10 4 ×1)]×(1/0.1)÷Cpr
=92.25×[(A4-A3)-(A2-A1)]÷Cpr;
    △A265/min =(△A 测定管-△A 空白管)/2,即每分钟吸光值变化;ε :产物在 265nm 处摩尔吸光系数为 5.42×10 4 mol/L • cm,106:摩尔分子换算成微摩尔分子;d:比色杯光径(cm) ;V 总:反应总体积(ml) ,V 样:所用样品体积(ml) ;Cpr:蛋白浓度(mg/ml) 。


注意事项:

试剂一、试剂三和试剂四均需临用前配制。
样品处理等过程均需要在冰上进行,且须在当日测定酶活力。
稀释液一有挥发性和刺激性,吸取时好戴手套和口罩,好用移液管吸取。

 相关文献:

 《Exogenous 24-Epibrassinolide alleviates oxidative damage from copper stress in grape (Vitis vinifera L.) cuttings》 作者:Ya-li Zhou,Su-fang Huo,Li-ting Wang,Jiang-fei Meng,Zhen-wen Zhang,Zhu-mei Xi 期刊:Plant Physiology and Biochemistry 影响因子:3.404 PMID:30099273

脱氢抗坏血酸还原酶活性测定试剂盒 维生素C

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