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产品名称:

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶测试盒 糖异生

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-03-24
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶测试盒 糖异生
PEPCK(EC 4.1.1.32)广泛存在于动物、开花植物、藻类、部分真菌和细菌中。该酶催化草酰 乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,是调节糖异生途径的一限速酶。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC3310
规格50管/48样供货周期现货
主要用途丙酮酸羧激酶(PEPCK)检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶测试盒 糖异生
货号:BC3310
规格:50管/48样
测试方法:微量法PEPCK(EC 4.1.1.32)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,是调节糖异生途径的关键酶。

测定原理:
PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。

需自备的仪器和用品:
分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性检测试剂盒说明书
紫外分光光度法

注意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号:BC3310
规格:50T/48S
产品内容:
提取液:液体 60mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 45 mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:粉剂 35 mL×1 瓶,-20℃避光保存;临用前加入 35mL 试剂一溶解。可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融。
试剂三:液体 45µL×1 支,4℃避光保存;临用前加入蒸馏水按体积比 1:120 稀释,现用现配;
试剂四:液体 155µL×1 支,4℃避光保存;临用前加入蒸馏水按体积比 7:250 稀释,现用现配;
试剂五:粉剂×1 瓶,-20℃避光保存;临用前加入 2.5mL 蒸馏水充分溶解;可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融。

产品说明:
PEPCK(EC 4.1.1.32)广泛存在于动物、开花植物、藻类、部分真菌和细菌中。该酶催化草酰乙酸转化为磷酸烯醇式丙酮酸,是调节糖异生途径的第1限速酶。PEPCK 催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和 CO2,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH 氧化生成 NAD+,在 340nm 下测定 NADH 下降速率,即可反映 PEPCK 活性。

试验中所需的仪器和试剂:
紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、1mL 石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤:
一、粗酶液提取:
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入1mL 提取液)进行冰浴匀浆,然后 8000g,4℃,离心 10min,取上清,置冰上待测。

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

血清(浆)样品:直接检测。

二、测定步骤:
1、紫外分光光度计预热 30min 以上,调节波长 340nm,蒸馏水调零。
2、工作液的配制:将试剂二、试剂三、试剂四按 7:1:1(V:V:V)的比例配制工作液,工作液现用现配。
3、将工作液置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)预热 5 分钟。
4、操作表:在 1mL 石英比色皿中依次加入下列试剂:

相关文献:

 《Hepatic c-Jun regulates glucose metabolism via FGF21 and modulates body temperature through the neural signals》 作者:FeiXiao15YajieGuo15JialiDeng1FeixiangYuan1YuzhongXiao1LijianHui2YuLi1ZhiminHu1YuncaiZhou3KaiLi3XiaoHan3QichenFang4WeipingJia4YanChen1HaoYing1QiweiZhai1ShanghaiChen1FeifanGuo 期刊:Molecular Metabolism 影响因子:6.181 PMID:30579932

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