品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC1180 |
规格 | 50管/48样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量检测 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农业,综合 |
氧化型谷*甘肽含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC1180
规格:50T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体170 μL×1支 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体60 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 液体8 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂五 | 粉剂×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂六 | 液体40 μL×1支 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
试剂二:有毒易挥发试剂,涉及该试剂的步骤建议在通风橱内操作。
试剂五:临用前加入8 mL蒸馏水,溶解后-20℃分装可保存4周,避免反复冻融。
试剂六工作液:先将试剂六内液体离心至底部再用移液枪吹打混匀使用。临用前根据样本数量按照试剂六:蒸馏水=1μL:20μL(21μL,约2T)的比例配制备用,现用现配。
标准品:10mg氧化型谷*甘肽。临用前加入1 mL蒸馏水,充分溶解,浓度为10 mg/mL,2-8℃可保存4周。
产品说明:
氧化型谷*甘肽是谷*甘肽(GSH)的氧化形式,又称为二硫代谷*甘肽,是两分子的谷*甘肽氧化而成。*会被谷*甘肽还原酶还原成GSH,因此机体中大多数是以还原型形式存在。测定细胞内GSH和*含量以及GSH/*比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。本试剂盒利用谷*甘肽能和5,5’-二硫代-双-(2-*甲酸)(5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid,DTNB)反应产生2-硝基-5-*甲酸,2-硝基-5-*甲酸在波长412nm处具有最大光吸收的特点,通过2-乙烯吡啶抑制样本中原有的还原型谷*甘肽,然后利用谷*甘肽还原酶将*还原为GSH,借此测定氧化型谷*甘肽的含量。
技术指标:
低检出限:1.369 μg/mL
线性范围:1.5625-50 μg/mL
意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、分析天平、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、移液器、1mL玻璃比色皿、匀浆器/研钵/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
操作步骤:具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项:
若不确定样本中*含量的高低,可稀释几个梯度后再进行测量。
如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
因为试剂一中含有蛋白质沉淀剂,因此上清液不能用于蛋白浓度测定。如需测定蛋白含量,需另取组织。
相关发表文献:
Hua Li,Lanying Wang,Yanping Luo. Composition Analysis by UPLC-PDA-ESI (−)-HRMS and Antioxidant Activity Using Saccharomyces cerevisiae Model of Herbal Teas and Green Teas from Hainan. Molecules. October 2018;(IF3.06)
Chen Z Y, Wang Y T, Pan X B, et al. Amelioration of cold-induced oxidative stress by exogenous 24-epibrassinolide treatment in grapevine seedlings:Toward regulating the ascorbate–glutathione cycle[J].Scientia horticulturae,2019,244:379-387.
参考文献:
Alpert A J, Gilbert H F. Detection of oxidized and reduced glutathione with a recycling postcolumn reaction[J]. Analytical biochemistry, 1985, 144(2): 553-562.
Owens C W I, Belcher R V. A colorimetric micro-method for the determination of glutathione[J]. Biochemical Journal, 1965, 94(3): 705.
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