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产品名称:

还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒

产品品牌: 索莱宝 价格: 240
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2019-12-10
还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒
规格:50管/48样
测试方法:可见分光光度法
GSH/GSSG 是细胞内Z重要的氧化还原对之一。因此,测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态,也是谷胱甘肽氧化还原循环的主要指标之一。

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝货号BC1170
规格50管/48样供货周期现货
主要用途还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测应用领域医疗卫生,化工,生物产业,石油

还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒
测定试剂盒说明书


研究意义:
    GSH/GSSG 是细胞内重要的氧化还原对之一。因此,测定细胞内 GSH 和 GSSG 含量以及 GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态,也是谷胱甘肽氧化还原循环的主要指标之一。此外,总谷胱甘肽(total glutathione, tGSH)含量还能够反映细胞 γ-谷氨酰循环状态。通过该试剂盒,可以获得四个指标,即 GSH 含量、GSSG 含量、总谷胱甘肽含量和 GSH/GSSG 比值。


测定原理:
    利用循环法测组织中总谷胱甘肽含量,2-VP 法测 GSSG 含量。总谷胱甘肽含量=GSH+2GSSG,该指标与谷胱甘肽氧化还原循环无关,只与 γ-谷氨酰循环状态,即 GSH 合
成和降解有关。


实验中所需仪器及设备:
    可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1ml 比色皿、双蒸水


试剂组成和配置:

试剂一×1 支;加双蒸水 100ml,充分溶解,4℃保存,用于试剂二和试剂三溶解
试剂二×1 支;加试剂一 11ml 充分溶解,4℃保存;
试剂三×1 支;临用前,加试剂一 11ml 充分溶解;
试剂四×1 支,稀释液四×1 支,临用前,加 1ml 稀释液四稀释试剂四;
液体五×1 支;
试剂六×1 支,充分溶解于 50ml 双蒸水;
GSH 标准品×1 支;临用前,加双蒸水定容 100ml,然后稀释 10 倍,则为 10μmol/L;
GSSG 标准品×1 支;临用前,加双蒸水定容 100ml,然后稀释 10 倍,则为 10μmol/L。

 

样品前处理:
    称取约 0.1g 样品,加 1ml 试剂六,冰上充分研磨, 8000rpm 4℃离心 10min,取上清。 (如上清不清澈,再离心 3min)


总谷胱甘肽含量测定:
    1、将试剂一于 25℃预热 30min
    2、按下表操作

 标准管测定管
试剂二0.1ml0.1ml
试剂三0.1ml0.1ml
标准品0.1ml/
样品 /0.1ml
试剂一0.7ml0.7ml
试剂四0.1ml0.1ml

  加试剂四后,迅速混匀,于 412nm处测定吸光值,记录 30s 和 150s 的数据,分别记为 A1、A2、A3 和 A4。


GSSG 含量测定:
    1、将试剂一于 25℃预热 30min
    2、按下表操作

 标准管测定管
标准品0.1ml
样品0.1ml
试剂五2μL 2μL 

加试剂五后混匀, 于37℃水浴30min后, 取0.1ml溶液进行下一步测定, 即下表中样品0.1mL。

 标准管测定管
试剂二 0.1ml0.1ml
试剂三 0.1ml0.1ml
标准品0.1ml/
样品/0.1ml
试剂一0.7ml 0.7ml 
试剂四0.01ml0.01ml

加试剂四后,迅速混匀,于 412nm 处测定吸光值,记录 30s 和 150s 的数据,分别记为 B1、
B2、B3 和 B4。
tGSH 含量计算
tGSH(μmol/g)=(A4-A3)÷(A2-A1)×标准浓度(10μmol/L)×样品测定前稀释倍数
÷样品质量(g) ,
GSSG(μmol/g)=(B4-B3)÷(B2-B1)×标准浓度(10μmol/L)×样品测定前稀释倍数
÷样品质量(g) ,
GSH(μmol/g)=tGSH-2×GSSG。


注意事项:
    1、测定前请先用 1~2 个样本做预实验,如吸光值很高,则需用试剂六稀释到适当倍数,使得测定过程吸光值呈线性变化
    2、配制试剂以及样品处理都需在低温下,可置于冰上
    3、因为提取过程中去掉蛋白质,所以提取液不能用于测定蛋白含量。如需测样品的蛋白含
量,请事先将样品分成两份
    4、测定时也可将标准品配制成不同浓度后,制作成标准曲线,然后将测定样品代入标准曲
线计算,标准品配制的浓度一般不超过 20μmol/L

相关文献:

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《MicroRNA-98 reduces amyloid β-protein production and improves oxidative stress and mitochondrial dysfunction through the Notch signaling pathway via HEY2 in Alzheimer's disease mice》 作者:Fang?Zhou Chen Ying Zhao Hui?Zhao Chen 期刊:International Journal of Molecular Medicine 影响因子:2.928 PMID:30365070
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《Light-Responsive Metal–Organic Framework as an Oxidase Mimic for Cellular Glutathione Detection》 作者:Yufeng Liu,Min Zhou,Wen Cao,Xiaoyu Wang,Quan Wang,Sirong Li and Hui Wei 期刊:Anal Chem. 影响因子:6.35 PMID:31148448
 

 

还原型谷胱甘肽(GSH)含量检测试剂盒

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