漆酶活性检测试剂盒 其他系列

漆酶活性检测试剂盒 其他系列
货号：BC1630
规格：100管/48样
测试方法：微量法

 英文名称：Laccase activity test kit
关键词：漆酶活性|漆酶活性检测|漆酶活性测定
漆酶活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC1630
规格：50T/48S

产品内容：
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×2 瓶，4℃避光保存。

产品说明：
漆酶（CE1.10.3.2）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，漆酶存在菇、菌及植物中，是一种环保型酶，其*的催化性质在生物检测中有广泛的应用。漆酶分解底物 ABTS 产生 ABTS 自由基，在 420nm 处的吸光系数远大于底物 ABTS，测定 ABTS 自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。

试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计、低温离心机、1mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、天平、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水，水浴锅。

操作步骤：
一、粗酶液提取：
（1）组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入1mL 提取液），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
（2）细胞：按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；然后4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
（3）培养液：直接检测。

相关文献：
《Transcriptional analysis of the laccase-like gene from Burkholderia cepacia BNS and expression in Escherichia coli.》 作者:Yinghui Ma,Lijun Li,Haixia Tian,Meihuan Lu,Mallavarapu Megharaj,Wenxiang He 期刊:Appl. Microbiol. Biotechnol. 影响因子:3.67 PMID:30362077

测定意义
    漆酶（Laccase）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。

测定原理
    漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基，在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。

自备实验用品及仪器
    天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。

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