品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | 货号 | BC0195 |
---|---|---|---|
规格 | 100管/48样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 检测样本中的多酚氧化酶活性含量 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,农业 |
多酚氧化酶(PPO)活性检测试剂盒说明书微量法
注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
货号:BC0195
规格:100T/48S
产品内容:提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存,用前混匀即可;试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体5mL×1瓶,4℃保存。
多酚氧化酶(PPO)活性生化检测试剂盒产品说明:PPO(EC1.10.3.1)是一种广泛存在于植物体内的含铜的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化产生醌,从而引起褐化,与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。PPO能够催化邻苯二酚产生邻苯二醌,后者在410nm有特征光吸收。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、粗酶液提取:
二、测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长410nm,蒸馏水调零。
2.样本测定(在EP管中依次加入下列试剂)
充分混匀,5000g,常温离心10min,收集上清,取200μL微量玻璃比色皿或96孔板中,410nm处检测测定管和对照管吸光度,计算ΔA=A测定-A对照。
注意:每个测定管需要设置一个对照管,可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液,然后集中进行5min沸水浴处理。
多酚氧化酶(PPO)活性生化检测试剂盒PPO活性计算:
a. 用微量玻璃比色皿测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:单位的定义:每分钟每mg组织蛋白在每mL反应体系中使410nm处吸光值变化0.01定义为一个酶活力单位。PPO(U/mgprot)=ΔA÷0.01×V反总÷(Cpr×V样)÷T=60×ΔA÷Cpr
b. 用96孔板测定的计算公式如下
(1)按样本蛋白浓度计算:单位的定义:每分钟每mg组织蛋白在每mL反应体系中使410nm处吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。PPO(U/mgprot)=ΔA÷0.005×V反总÷(Cpr×V样)÷T=120×ΔA÷Cpr
注意事项:不同样本的多酚氧化酶适合的反应温度略有差别,可在25-37℃之间进行调节。
相关文献:
《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li,Yang Ding,Xiuli Tang,Guoyi Wang,Shujuan Wu,Xianxian Li,Xiaofei Huang,Tongtong Qu,Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影响因子:3.032 PMID:
《MTA1 promotes the invasion and migration of pancreatic cancer cells potentially through the HIF-α/VEGF pathway》 作者:B Li, Y Ding, X Tang, G Wang, S Wu, X Li 期刊:Journal of Receptor and Signal Transduction Research. 影响因子:2.998 PMID:30396299