品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | 货号 | BC0215-100管/96样 |
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规格 | 100管/96样 | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 检测样本中的苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,农业 |
苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性检测试剂盒说明书 微量法
注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
货号:BC0215
规格:100T/96S
产品内容:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1 瓶,4℃保存。临用前每瓶加入 4mL 双蒸水充分溶解待用,可 4℃保存一周。 试剂三:液体 1mL×1 瓶,4℃保存。
苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性生化检测试剂盒
产品说明:
PAL(EC4. 3 1 5)广泛存在于各种植物和少数微生物中,是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶和 限速酶,在动物体内尚未发现。与一些重要的次生物质如木质素、类黄酮类植保素、黄酮类色素等 合成密切相关,在植物正常生长发育、抗病、抗逆反应中起重要作用。 PAL 催化 L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨,反式肉桂酸在 290nm 处有大吸收值,通过测 定吸光值升高速率计算 PAL 活性。
所需的仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、 研钵、冰和蒸馏水。
苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性生化检测试剂盒
操作步骤:
一、粗酶液提取 称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10 分钟,取上清,置冰上 待测。
测定步骤
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长 290nm,蒸馏水调零。
在 EP 管或 96 孔板中按顺序加入下列试剂
混匀,静置 10min 后,290nm 处记录测定管吸光值 A1 和对照管吸光值 A2,△A=A1-A2。 注意:对照管只要做一管
PAL 活性计算
用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1) 按蛋白浓度计算 单位的定义:每 mg 组织蛋白在该反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.1 定义为一个酶活性 单位。 PAL(U/mg prot)=ΔA×V 样总÷V 样÷0.1÷T÷Cpr =66.7×ΔA÷Cpr
用 96 孔板测定的计算公式如下
(1) 按蛋白浓度计算 单位的定义:每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.05 定义为一个酶活性单 位。 PAL(U/mg prot)=ΔA×V 样总÷V 样÷0.05÷T÷Cpr =133.4×ΔA÷Cpr
(2) 按按样本鲜重计算 单位的定义:每 g 组织在反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.05 定义为一个酶活性单位。 PAL(U/g 鲜重)=ΔA×V 样总÷V 样÷0.05÷T÷W =133.4×ΔA÷W V 样:加入样本体积,5µL;V 样总:加入提取液体积,1 mL;T:反应时间,30 min;Cpr:样本 蛋白质浓度,mg/mL;W:样品质量。
相关文献:
《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li,Yang Ding,Xiuli Tang,Guoyi Wang,Shujuan Wu,Xianxian Li,Xiaofei Huang,Tongtong Qu,Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影响因子:3.032 PMID: