苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性生化检测试剂盒

苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性检测试剂盒说明书 微量法

注意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 

货号：BC0215 

规格：100T/96S

产品内容：  

提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存。

试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1 瓶，4℃保存。临用前每瓶加入 4mL 双蒸水充分溶解待用，可 4℃保存一周。 试剂三：液体 1mL×1 瓶，4℃保存。

苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性生化检测试剂盒

产品说明： 

PAL（EC4. 3 1 5）广泛存在于各种植物和少数微生物中，是植物体内苯丙烷类代谢的关键酶和 限速酶，在动物体内尚未发现。与一些重要的次生物质如木质素、类黄酮类植保素、黄酮类色素等 合成密切相关，在植物正常生长发育、抗病、抗逆反应中起重要作用。 PAL 催化 L-苯丙氨酸裂解为反式肉桂酸和氨，反式肉桂酸在 290nm 处有大吸收值，通过测 定吸光值升高速率计算 PAL 活性。

所需的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、 研钵、冰和蒸馏水。

苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性生化检测试剂盒

操作步骤：

一、粗酶液提取 称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心 10 分钟，取上清，置冰上 待测。 

测定步骤

1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长 290nm，蒸馏水调零。

在 EP 管或 96 孔板中按顺序加入下列试剂

混匀，静置 10min 后，290nm 处记录测定管吸光值 A1 和对照管吸光值 A2，△A=A1-A2。 注意：对照管只要做一管

PAL 活性计算 

用微量石英比色皿测定的计算公式如下 

（1） 按蛋白浓度计算 单位的定义：每 mg 组织蛋白在该反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.1 定义为一个酶活性 单位。 PAL（U/mg prot）=ΔA×V 样总÷V 样÷0.1÷T÷Cpr =66.7×ΔA÷Cpr

• 按按样本鲜重计算 单位的定义：每 g 组织在该反应体系中分钟使 290nm 下吸光值变化 0.1 定义为一个酶活性单位。 PAL（U/g 鲜重）＝ΔA×V 样总÷V 样÷0.1÷T÷W =66.7×ΔA÷W V 样：加入样本体积，5µL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，30 min；Cpr：样本 蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量。

用 96 孔板测定的计算公式如下

（1） 按蛋白浓度计算 单位的定义：每 mg 组织蛋白在反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.05 定义为一个酶活性单 位。 PAL（U/mg prot）=ΔA×V 样总÷V 样÷0.05÷T÷Cpr =133.4×ΔA÷Cpr

（2） 按按样本鲜重计算 单位的定义：每 g 组织在反应体系中每分钟使 290nm 下吸光值变化 0.05 定义为一个酶活性单位。 PAL（U/g 鲜重）＝ΔA×V 样总÷V 样÷0.05÷T÷W =133.4×ΔA÷W V 样：加入样本体积，5µL；V 样总：加入提取液体积，1 mL；T：反应时间，30 min；Cpr：样本 蛋白质浓度，mg/mL；W：样品质量。

相关文献：

《Effect of L-Arginine on Maintaining Storage Quality of the White Button Mushroom (Agaricus bisporus)》 作者:Beibei Li，Yang Ding，Xiuli Tang，Guoyi Wang，Shujuan Wu，Xianxian Li，Xiaofei Huang，Tongtong Qu，Jifeng Chen 期刊:Food and Bioprocess Technology 影响因子:3.032 PMID: