总巯基含量检测试剂盒 微量法

总巯基含量检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC1375
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：
标准品：10 mg还原型谷*甘肽（GSH）。临用前加入1.3 mL蒸馏水，配制成25 µmol/mL，2-8℃保存两周。
产品说明：
生物体内巯基主要包括谷*甘肽巯基和蛋白质巯基。前者不仅能够修复氧化损伤的蛋白质，而且参与活性氧清除，后者对于维持蛋白质构象具有重要作用。通过测定总巯基含量和GSH含量，能够间接测定蛋白质巯基含量。
巯基基团与5,5’-二硫代-双-*甲酸（DTNB）反应，生成黄色化合物，在412nm处有最大吸收峰。

技术指标：
最检出限：0.0088 μmol/mL
线性范围：0.015625-1 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、台式离心机、恒温水浴锅、研钵/匀浆器和蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：
如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。
相关发表文献：

1. Yang X, Xu J, Fu C, et al. The cataract-related S39C variant increases γ S-crystallin sensitivity to environmental stress by destroying the intermolecular disulfide cross-links[J]. Biochemical and Biophysical Research Communications, 2020.

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