尿酸(UA)含量检测试剂盒 微量法

尿酸（UA）含量检测试剂盒说明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC1365
规格：100T/48S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂四：粉剂置于试剂瓶内玻璃管中。临用前加入6 mL试剂一，充分混匀后备用；用不完的试剂-20℃分装保存，避免反复冻融。-20℃可保存4周。

2. 标准品：2.5 µmol/mL 尿酸溶液。

3. 工作液A的配制：按照试剂二：试剂三：试剂四=250μL：750μL：500μL（10S）的比例配制，用于样本测定管、空白管及标准管的检测。根据样本量现配现用，配后建议2小时内用完（2-8℃或者冰上保存）。

4. 工作液B的配制：按照试剂二：试剂三：试剂一 =250μL：750μL：500μL（10S）的比例配制，用于样本对照管的检测。根据样本量现配现用，配后建议2小时内用完（2-8℃或者冰上保存）。

产品说明：
尿酸为嘌呤代谢的终末产物，嘌呤代谢紊乱、能量代谢异常及肾脏对尿酸的排泄障碍等均可引起血浆尿酸水平升高或降低，进而导致多种疾病如通风、肾病、心血管疾病的发生，尿酸含量的测定在临床诊断中有着重要的指导意义。
尿酸酶催化尿酸分解为尿*素、CO₂和H₂O₂，H₂O₂氧化亚铁*中的Fe²⁺生成Fe³⁺，Fe³⁺进一步与4-氨基安*比林和酚反应生成红色醌类化合物，在505nm处有特征吸收峰，通过测定505nm处的吸光值来计算尿酸的含量。


技术指标：
低检出限：0.00388 μmol/mL
线性范围：0.003906-0.8 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：


可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、蒸馏水、冰、EP管。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
注意事项：

1. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。注意同步修改计算公式。

2、工作液A与工作液B，需根据样本量现配现用，配后建议2小时内用完（2-8℃或者冰上保存）。工作液为淡黄色溶液，如有变色，则视为失效，需重新配制。
实验实例：

1. 取0.1g大鼠肾脏加入1mL提取液进行匀浆研磨，离心取上清后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.591-0.347=0.244，带入标曲y=1.7648x+0.0127，计算x=0.131，按样本质量计算含量得：

UA含量（μg/g质量）=168x÷W=168×0.131÷0.1=220.08 μg/g 质量。

1. 取鹅血清后按照测定步骤操作，使用96孔板测得计算ΔA测定=A测定管-A对照管=0.217-0.093=0.124，带入标曲y=1.7648x+0.0127，计算x=0.063，按液体体积计算含量得：

UA含量（μg/mL血清）=168x =168×0.063=10.584 μg/mL血清。
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