血钾浓度检测试剂盒 微量法

血钾浓度检测试剂盒说
明书
微量法
注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：BC2775
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

溶液的配制：

1. 试剂一工作液：临用前按试剂一（mL）：浓硫酸（μL）=5:12的比例按需配制；

2. 试剂二：临用前配制，取1.2mL试剂二A加入到试剂二B瓶中，混匀，2-8℃保存1周；

3. 标准液：2 μmol/mL 钾标准液。

产品说明：
钾保持机体的正常渗透压及酸碱平衡，参与糖及蛋白代谢，保证神经肌肉的正常功能。血清钾高于5.5mmol/L时称高血钾，高血钾可使神经、肌肉应激性增高，使心肌应激性降低，导致心动过缓，血清钾超过10mmol/L时，可发生心室纤颤，甚至心脏在舒张期停跳。血清钾低于3.5mmol/L时称低血钾，低血钾可引起肌无力甚至肌肉弛缓性麻痹，引起心肌应激性增高，出现心动过速、心律紊乱甚至在收缩期停跳。因此血清钾是常用的生化测定指标。
血清中钾离子与四苯硼钠作用，形成不溶于水的四苯硼钾，产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比。通过测定其浊度来测定血清钾含量。

技术指标：
低检出限：0.0175 μmol/mL
线性范围：0.125-3 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、浓硫酸、蒸馏水。
操作步骤：具体操作步骤详见“产品资料"附件
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
血清预处理：取EP管，依次加入50μL血清，450μL试剂一工作液，充分混匀后室温（25℃左右），8000rpm，离心10min，取上清液，待测。

二、测定步骤
1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长到520nm，分光光度计蒸馏水调零。
2. 试剂三置于25℃水浴中预热30min以上。
3. 标准溶液的稀释：取100μL 2 μmol/mL钾标准液，加入100μL蒸馏水，充分混匀，配制成1 μmol/mL标准液使用，现用现配。（实验中每管需要40μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
4. 操作表：

三、血钾浓度计算
血钾浓度（μmol/mL）=[C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×样本稀释倍数
                       =10×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液：1 μmol/mL；样本稀释倍数：(50μL血清+450μL试剂一)÷50μL血清=10。
注意事项
1、采血后宜尽早进行血清钾测定，时间过长会影响血清钾含量。
2、如果样本吸光值大于1.1，建议将样本用试剂一工作液稀释后进行测定。
实验实例：

1. 取小鼠血清按照测定步骤操作，使用96孔板测得A测定管= 0.261，A空白管=0.048，A标准管=0.427，计算：

血钾浓度（μmol/mL）=10×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)=5.62 μmol/mL。
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