品牌 | SOLARBIO/索莱宝 | CAS | 详询 |
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分子式 | 详询 | 纯度 | 详询 |
分子量 | 详询 | 货号 | BC4265 |
规格 | 100T/96S | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 直链淀粉含量检测 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合 |
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体100 mL×1瓶(自备) | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体55 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | - | 2-8℃保存 |
试剂五 | 液体0.5 mL×1支 | 2-8℃保存 |
试剂六 | 液体10mL×1支 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1支 | 2-8℃保存 |
试剂二:*100 mL自备;
试剂四:提供125 mL空瓶一个;将试剂三:H2O =9 mL:91 mL混匀,现用现配,2-8℃保存半年;
标准品:10 mg直链淀粉。临用前加入0.1 mL无水乙醇和0.9 mL试剂三,混匀后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10 mg/mL的直链淀粉,2-8℃保存半年。
样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
称取0.01g烘干样本,加入1mL试剂一,充分匀浆;
80℃水浴提取30min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀;
在步骤2沉淀中加入1mL试剂二(*)振荡 5min;3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀;
在步骤3沉淀中加入5mL试剂四充分溶解,90℃水浴10min,冷却后3000g,25℃离心5min,取上清待测。
分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节双波长至550nm和485nm,分光光度计蒸馏水调零。
标准溶液的稀释:取40μL 10mg/mL标准溶液,加入960μL试剂四,充分混匀,配制成0.4mg/mL标准溶液使用,现用现配。(实验中每管需要20μL,为减小实验误差,故配制大体积。)
操作表 (在1.5mL离心管或96孔板中依次加入下列试剂) :
试剂名称 | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
样本(µL) | 20 | - | - |
标准溶液(μL) | - | 20 | - |
蒸馏水(µL) | - | - | 20 |
试剂五(µL) | 4 | 4 | 4 |
试剂六(µL) | 4 | 4 | 4 |
蒸馏水(µL) | 172 | 172 | 172 |
充分混匀,测定550nm和485nm处的吸光值,550nm下的测定管、标准管、空白管分别记为A测定、A标准和A空白,485nm下的分别记为A’测定、A’标准和A’空白,计算ΔA测定=(A测定-A空白)-(A’测定-A’空白),ΔA标准=(A标准-A空白)-(A’标准-A’空白)。标准管和空白管只需测1-2次。 |
反应后建议在20min内检测完成防止褪色。
若A测定大于0.95,建议样本上清用试剂四稀释后再进行测定;若A测定低于0.07时,可以提取时减少试剂四体积进行测定。注意同步修改计算公式。
取0.01g烘干玉米于研钵中研碎,加入1mL试剂一,充分匀浆后转移到 EP 管中,80℃水浴提取30min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL试剂二(*)振荡5min,3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入5mL试剂四充分溶解,90℃水浴10min,冷却后3000g,25℃离心5min,取上清,之后按照测定步骤操作,使用96孔板测得计算ΔA测定=(A测定-A空白)-(A’测定-A’空白)=(0.395-0.047)-(0.283-0.058)=0.123,ΔA标准=(A标准-A空白)-(A’标准-A’空白)=(0.517-0.047)-(0.317-0.058)=0.211,按样本质量计算含量得:直链淀粉含量(mg/g 质量)=2×ΔA测定÷ΔA标准÷W=116.59 mg/g 质量。
直链淀粉含量检测试剂盒 微量法 直链淀粉含量检测试剂盒 微量法