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  • 直链淀粉含量检测试剂盒 微量法
产品名称:

直链淀粉含量检测试剂盒 微量法

产品品牌: SOLARBIO/索莱宝 价格:
厂商性质: 生产厂家 产品时间: 2024-04-15
储存条件
2-8℃
中文名称
直链淀粉含量检测试剂盒 微量法
有效期
6个月
单位

英文名称
Amylose Content Assay Kit
检测方法
微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
规格
100T/96S
自备试剂
该试剂盒实验过程中需自备试剂,详情见网站说明书

产品概述

品牌SOLARBIO/索莱宝CAS详询
分子式详询纯度详询
分子量详询货号BC4265
规格100T/96S供货周期现货
主要用途直链淀粉含量检测应用领域环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合


直链淀粉含量检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
货号:BC4265
规格:100T/96S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件
试剂一液体110 mL×1瓶2-8℃保存
试剂二液体100 mL×1瓶(自备)2-8℃保存
试剂三液体55 mL×1瓶2-8℃保存
试剂四-2-8℃保存
试剂五液体0.5 mL×1支2-8℃保存
试剂六液体10mL×1支2-8℃保存
标准品粉剂×12-8℃保存
溶液的配制:
  1. 试剂二:*100 mL自备;

  2. 试剂四:提供125 mL空瓶一个;将试剂三:H2O =9 mL:91 mL混匀,现用现配,2-8保存半年;

  3. 标准品:10 mg直链淀粉。临用前加入0.1 mL无水乙醇和0.9 mL试剂三,混匀后封口膜封口,沸水浴至溶解,即10 mg/mL的直链淀粉,2-8℃保存半年。

产品说明:
直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链,直链淀粉含量影响着食品的食用品质和外观品质,与食品安全息息相关。
直链淀粉和碘形成蓝色络合物,利用乙醇分开样本中的可溶性糖和淀粉,再用碘与其反应得到直链淀粉含量。

技术指标:
低检出限:0.0019 mg/mL
线性范围:0.025-0.8 mg/mL
注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、天平、台式离心机、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、*、无水乙醇、EP管、蒸馏水。
操作步骤:
  • 样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献

  1. 称取0.01g烘干样本加入1mL试剂一,充分匀浆

  2. 80℃水浴提取30min3000g25℃离心5min,弃上清,留沉淀

  3. 在步骤2沉淀中加入1mL试剂二(*)振荡 5min3000g,25℃离心5min,弃上清,留沉淀

  4. 在步骤3沉淀中加入5mL试剂四充分溶解,90℃水浴10min,冷却后3000g25℃离心5min,取上清待测。

二、测定步骤
  1. 分光光度计/酶标仪预热30min以上,调节双波长至550nm485nm,分光光度计蒸馏水调零。

  2. 标准溶液的稀释:取40μL 10mg/mL标准溶液,加入960μL试剂四,充分混匀,配制成0.4mg/mL标准溶液使用,现用现配。(实验中每管需要20μL,为减小实验误差,故配制大体积。)

  3. 操作表 (在1.5mL离心管或96孔板中依次加入下列试剂)

试剂名称测定管标准管空白管
样本(µL)20--
标准溶液(μL-20-
蒸馏水(µL)--20
试剂五(µL)444
试剂六(µL)444
蒸馏水(µL)172172172
充分混匀,测定550nm和485nm处的吸光值,550nm下的测定管、标准管、空白管分别记为A测定、A标准和A空白,485nm下的分别记为A’测定、A’标准和A’空白,计算ΔA测定=A测定-A空白)-A’测定-A’空白),ΔA标准=A标准-A空白)-A’标准-A’空白)。标准管和空白管只需测1-2次。
三、直链淀粉含量计算
直链淀粉含量(mg/g质量)=ΔA测定÷ΔA标准÷C标准)×V样总÷W=2×ΔA测定÷ΔA标准÷W
C标准:标准溶液浓度,0.4mg/mLV样总:加入试剂四体积,5mLW:样本质量,g
注意事项:
  1. 反应后建议在20min内检测完成防止褪色。

  2. 若A测定大于0.95,建议样本上清用试剂四稀释后再进行测定;若A测定低于0.07时,可以提取时减少试剂四体积进行测定。注意同步修改计算公式。

实验实例:
  1. 取0.01g烘干玉米于研钵中研碎,加入1mL试剂一,充分匀浆后转移到 EP 管中,80℃水浴提取30min3000g25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入1mL试剂二(*)振荡5min3000g25℃离心5min,弃上清,留沉淀,加入5mL试剂四充分溶解,90℃水浴10min,冷却后3000g25℃离心5min,取上清,之后按照测定步骤操作,使用96孔板测得计算ΔA测定=A测定-A空白)-A’测定-A’空白)=0.395-0.047-0.283-0.058=0.123ΔA标准=A标准-A空白)-A’标准-A’空白)=0.517-0.047-0.317-0.058=0.211,按样本质量计算含量得:直链淀粉含量(mg/g 质量)=2×ΔA测定÷ΔA标准÷W=116.59 mg/g 质量。

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