维生素A含量检测试剂盒 微量法

维生素 A 含量检测试剂盒说明书

高效液相色谱法 

注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。 

货号：BC4874 

规格：50T/48S 

产品简介：维生素 A 是一种脂溶性*生素，具有重要的生理药理作用，是为人体维持正常代谢和机能所必需的重要营养素。其主要生理功能包括维持上皮组织的完整性，维持各种细胞与细胞器中膜结构的通透和完整性、维持视觉的正常、促进结缔组织中粘多糖的合成等。当机体缺乏维生素 A 时，可能会造成上皮组织增生、角质化。维生素 A 在一定的光激发条件下具有荧光特性，可利用荧光检测器测定其含量。 

试验中所需的仪器和试剂：高效液相色谱仪（ZORBAX Extend C18 色谱柱（4.6×250 mm），荧光检测器（FLD））、台式离心机、可调式移液枪、研钵/匀浆器、混匀仪、EP 管、针头式过滤器（有机系）、注射器、抽滤器、滤膜（水系、有机系）、棕色进样瓶、超纯水、甲醇（色谱纯）、乙*、甲醇（分析纯），无水乙醇。 

产品内容：试剂一：粉剂×2 瓶，4℃避光保存；每瓶临用前加入 10 mL 无水乙醇，充分溶解，4℃避光保存。试剂二：液体 10 mL×1 瓶，4℃保存。试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。标准品：粉剂×1 瓶，-20℃避光保存。临用前加入 1 mL 无水乙醇配制成 5 mg/mL 维生素 A 标准溶液，-20℃密封保存，避免阳光直射。 

实验前准备工作：1. 将甲醇（色谱纯）用有机系滤膜抽滤作为流动相。2. 将抽滤好的流动相超声 20 min，除去气泡。4. 标准品的配制：将5 mg/mL的维生素A标准溶液用甲醇分别稀释成200μg/mL、40 μg/mL、8 μg/mL、1.6 μg/mL、0.32 μg/mL 的维生素 A 标准溶液。-20℃避光保存（密封），测试前采用有机系针头式过滤器过滤到棕色进样瓶内，待测

注意事项 

1. 测试完毕后，需要用高浓度的超纯水相清洗色谱柱（约 20-30 个柱体积），再用高浓度的有机相冲洗色谱柱，最后按柱子的种类规范冲洗，防止损伤色谱柱。

2. 标准品的稀释倍数要根据样品中维生素 A 的浓度确定，样品中维生素 A 的浓度必须在标准品溶液的浓度范围之内，该标准品的稀释倍数只是一个参考。若样本中维生素 A 浓度过高，建议稀释后再测。

3. 若样本量过大，建议每天测试一次标准溶液（一个标准溶液即可），以确定相应的保留时间，待测溶液测试前须放置至室温状态。

4. 为了排除溶剂的影响，可进行一次空白对照试验检测。

5. 萃取与洗涤过程中若分层界限不明显需延长静置时间，充分分层

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